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2024年5月30日发(作者：)

双荧光素酶报告实验原理

双荧光素酶报告实验（Dual-Luciferase Assay）是一种广泛应用于

生物学研究中的实验技术。它基于荧光素酶作为检测信号，可以用

于定量测定转录因子、信号通路、基因调控等生物学过程中不同分

子之间的相互作用。

双荧光素酶报告实验的原理是利用双荧光素酶体系（Dual-

Luciferase System）来检测目标基因的启动子活性或转录因子的激

活能力。这个体系包括了两个荧光素酶：火萤酶（Luciferase）和

海藻酶（Renilla Luciferase），它们分别与不同的底物相反应，产

生不同的荧光信号。

在双荧光素酶报告实验中，需要将目标基因的启动子区域或转录因

子响应元件与荧光素酶基因连接构建成一个报告基因。然后将其转

染到细胞中，用荧光素酶底物激发产生荧光信号，来检测该基因的

启动子活性或转录因子的激活能力。

对于双荧光素酶报告实验，有两个需要注意的点。第一，需要一个

参考基因来校正转染效率和细胞存活率的差异。一般来说，海藻酶

被用作参考基因，因为它的表达不受启动子区域或转录因子的影响。

第二，需要对实验进行两次测量，分别测量火萤酶和海藻酶的荧光

信号，来确保实验的准确性和可靠性。

双荧光素酶报告实验在生物学研究中有着广泛的应用，例如研究基

因调控、信号通路、细胞增殖、DNA损伤等生物学过程。它的优点

在于：不需要破坏细胞膜，能够在细胞内定量测定目标基因的启动

子活性或转录因子的激活能力，具有灵敏度高、准确性好等特点。

同时，双荧光素酶报告实验也有其局限性，例如需要构建报告基因、

转染、荧光素酶底物等步骤，需要使用专业仪器进行检测，费用较

高等。

双荧光素酶报告实验是一种基于荧光素酶体系的实验技术，可用于

定量测定转录因子、信号通路、基因调控等生物学过程中不同分子

之间的相互作用。它在生物学研究中有着广泛的应用，具有灵敏度

高、准确性好等特点，但也有其局限性。

本文标签： 荧光素酶实验基因信号需要

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