系统适用性之欧阳家百创编_图文

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2024年6月30日发(作者：)

欧阳索引创编 2021.02.02

系统适应性是在每天运行样品之

前，需要做的一系列测试，保证系

统运行正常，结果可靠。就相当于

对系统作一个mini版的认证，保证

当天的分析结果准确有效，别人能

认可。这里的系统,包括了仪器软硬

件,分析方法,样品制备,分析方法等

等等等.各种法规都有相关的指导,

但是也都没有给出特别具体的怎么

做的步骤. 我们先来看看这些高屋

建瓴地指导法规吧.1．USP(United

States Pharmacopeia)是怎么说的

呢? “System suitability tests are an

integral part of gas and liquid

chromatographic methods. They are

used to verify that the resolution and

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reproducibility of the

chromatographic system are adequate

for the analysis to be done. The tests

are based upon the concept that the

equipment, electronics, analytical

operations, and samples to be

analyzed constitute an integral system

that can be evaluated as such.”大概

意思是说：系统适应性(System

Suitability)是气相和液相色谱方法

的重要组成部分，用来确认色谱系

统的分离度和重复性能够满足当前

分析的要求。测试基于的原则是：

整个系统是由仪器，电路，分析方

法和样品所组成的，我们可以每个

每个地去测试, 但我们更要将其作

为一个整体去测试，从而验证整个

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系统的状态。 这也是为什么做了仪

器的硬件，软件认证(Compliance),

还要做系统适应性的原因：因为你

需要将包含了仪器软硬件，方法，

样品等这些方面的整个系统作为一

个整体，再进行测试。接着USP还

提到了柱效(column efficiency)和分

离度(Resolution)作为参考指标，但

是没有给出具体的参数要求。对于

精确度(Precision)来说，USP提

出：“Unless otherwise specified in

the individual monograph, data from

five replicate injections of the analyte

are used to calculate relative standard

deviation (SR) if the requirement is

2.0% or less; data from six replicate

injections are used if the relative

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standard deviation requirement is

more than 2.0%.”出了精确度的测

试以外，USP没有给出其他任何具

体的测试参考条件。但是，USP告

诉我们，一定要做系统适应性的测

试，否则，这台仪器做出的数据一

律无效。2．ICH(The International

Conference on Harmonization of

Technical Requirements for

Registration of Pharmaceuticals for

Human Use)是怎么说的？在章节 ”

Q2B: Validation of Analytical

Procedures: Methodology” 中， 提

到：“System suitability testing is an

integral part of many analytical

procedures. The tests are based upon

the concept that the equipment,

electronics, analytical operations, and

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samples to be analyzed constitute an

integral system that can be evaluated

as such. System suitability test

parameters to be established for a

particular procedure depend upon the

type of procedure being validated. See

pharmacopeias for additional

information.”基本跟USP说的差不

多，也没啥具体的东西。只是ICH

也同意，一定要将系统作为整体来

测试。3．FDA(The United States

Food and Drug Administration)是怎

么说的？FDA在其指导文件”

Guidance for Industry: Bioanalytical

Method Validation”中只提到一

句：“System suitability: Based

upon the analyte and technique, a

specific SOP [standard operating

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procedure] (or sample) should be

identified to ensure optimum

operation of the system used.”也没

说怎么做，看来看去，还是USP更

加靠谱一些。4．那我们只能总结

方方面面的建议，看看系统适应性

可能有哪些方面的要求？

a. 保留时间(retention time)。

保留时间是色谱图最直接的参数，

同时也是仪器稳定性的表现。我们

可以设定一个保留时间的窗口，既

能监测保留时间的一致，也能 应对

因为色谱柱逐渐老化所引起的保留

时间的漂移。

b. 分离度(resolution)。 分离度是

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表示两个峰分开的情况，也是系统

适应性的一个关键指标。一般我们

都需要设定一个分离度的下限

c. 响应(response)。如果你是

检测痕量样品，那最好将响应这一

项作为系统适应性的指标.当然,如

果样品浓度很高,或者只要出峰就

ok,那就不用这样做了.

d. LOD, LLOQ, and S/N.这几个

指标都是看低浓度样品的出峰情况

的，也是对于响应的另外一种测

试。

e. 塔板数(plate number)。一般来

说，分离度和响应指标都能达到，

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塔板数的意义都不是很大。所以如

果要把塔板数放到系统适应性的测

试里，在设定指标的时候，不用太

严格。不然，很多柱子还能用，你

就不得不把他们扔掉了。

f. 拖尾因子(tailing factor)。峰拖

尾会影响峰的分离，也是色谱柱老

化或者流动相配置是否合适的参考

指标。如果你的样品就是比较容易

拖尾，而且会影响到分析效果的时

候，建议还是将拖尾因子放入系统

适应性里。如果你的样品就一两个

峰，还离得特远，怎么拖尾都够不

着，那就没必要了。

g. 精确度(precision)。一般就是6

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针重复进样，然后看重复性如何。

如果最后计算时用外标的话，精确

度是能够保证自动进样器每次都进

同样体积的样品，检测器每次都有

同样的响应。 如果你用内标计算，

一般来说，就不用了。

h. 准确度(accuracy),这是测量值

和真实值的接近程度的指标。一般

来说，进样品之前，都会先进标

样，重新校正标准曲线。

i. 压力(pressure)。许多实验室都

有压力要求，系统压力超过设定值

就不继续进样了。这样可以减小仪

器的磨损，提前预知色谱柱的老化

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(色谱柱老化，一般也是从压力升高

开始的)。 在系统适应性里面加入

压力，可以减少在序列运行中，出

现系统超压或者色谱柱问题的可

能。

j. 空白(blank)。空白可以检查流

动相是否干净，确定仪器的残留情

况。在不同的情况下，空白可以是

基质提取的空白，也可以是某种溶

剂或者样品的溶剂。

k. 试运行(priming injection)。一

些方法要求在正式开始之前，先进

两三针样品，让其保留时间，面

积，拖尾等等都达到一个稳定值

后，再开始正式进样。

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l. 使用质控样品(QC Sample). 在

序列运行中加入一些已知浓度的样

品，通过用标准曲线去计算这个样

品的浓度，并与已知浓度比较。用

来检查整个系统的运行是否正常。

上面这些绝不是所有可能的测试，

但也不意味着你要再运行样品之

前，把这些测试都走一边，那估计

你就没时间来运行你的样品了。哪

些需要，取决于方法开发和分析人

员，来决定哪些测试能否保证系统

在正常的工作。一个设计巧妙的系

统适应性测试，能否在短短几针

内，判断出系统运行是否正常。省

得你花了时间运行样品，分析数

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据，最后数据不正常了，才发现是

整个系统哪儿有问题。从这个方

面，系统适应性的运行，是能否帮

助你省下不少时间，减低风险的。

这段我们说了系统适应性，那它跟

仪器的认证(OQPV)，跟方法确认

(Method Validation)是有着什么样的

关系呢？这个我们以后找机会讨论

吧。

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本文标签： 系统样品运行适应性