admin管理员组

文章数量:1532657

2024-07-28 作者:

26 ・论 著・ 表2灭茵后对器械的损伤对照表 March 2012,Vo1.10,NO.7 4总结 影响器械清洗、消毒、灭菌的效果因素很多很多,但要保证器 械物品的清洁及灭菌效果除了以上情况外还应对洗涤用水的电导 率、水压、水温进行监测以及正确选择清洗剂和使用的工具等均有 关。加强工作人员的责任心和核心制度的落实也很重要。另外不正 格率最高,即清洗效果最好,而省略对器械的拆分程序,会严重影响 腹腔镜器械的清洗质量。如果省略超声清洗后的手工刷洗程序,尽管 确的包装及包装材料不合格等都能影响灭菌效果。所以作为管理者 除了在使用材料上一定要严把质量关外,还应加强职工责任心教育 和技术的训练。我院领导非常重视这方工作为此专门从手术室调一 名护士到供应室去污组,负责腔镜器械的清洗 ]。总之:我们目前 对腔镜器械采用完整清洗流程后,给予高温灭菌加过氧化氢低温等 离子灭菌,在保证清洗和灭菌效果同时,也保障我院腔镜手术的顺 利开展。 清洗质量优于不拆分组,但仍然导致近1/3的器械不合格。因此完善清 洗流程,才能保证腹腔镜手术器械的清洗质量,才能降低院内感染的 发生。 3.2对灭菌质量监测的讨论:相对固定的灭菌方式对器械损伤较小 根据上述实验结果显示:三种灭菌方式灭菌都能达到理想的灭菌 效果,对灭菌结果通过生物监测得到保障。半年后器械的光泽度及完 好率进行对比。其结果:①高温灭菌使用时间短,成本低,运行起来 参考文献 [1] 中华人民共和国卫生部梢毒技术规范2002年版[s].2002. 方便。②低温灭菌时间长,灭菌容器小每次只能灭菌的器械很少,每 灭菌一锅成本高,对人体伤害较大、而且时间长不能满足临床需要 [2] 医院消毒供应中心规范化建设与科学化管理[s].2010. 【3]胡必杰,葛燕红.医院感染预防与控制标准操作规程(参考版)【s】. 2010. 等,优点就是对器械几乎没有损伤。③不固定的灭菌方式对器械损伤 太大,不能采取。所以要及时有效的满足临床需要,保障连台手术的 [4 姚英.4]腹腔镜器械的不同清洗流程的效果分析[J】.实用临床医药 杂志,2010,14(10):65—66. 供给,针对只有一套灭菌器。我们主张腹腔镜除了部分不能高温灭菌 的采取低温灭菌外,采取高温灭菌价格适宜、快速、环保、安全、对 器械损害不大。 【5】黄皓,成翼娟.医院消毒供应中心实用手册[M].北京:人民卫生出 版社,2009. TLR4、MyD88mRNA在胆脂瘤型中耳炎中的表达 杨珍珍张莉萍 (山西医科大学第二医院,山西太原030001) 【摘要】目的建立一种实时荧光RT-PCR方法,定量检测中耳胆脂瘤组织中TLR4、MyD88的表达水平。方法选取中耳胆脂瘤组织25份 为对照纽(其中13份为炎症纽,l2份为非炎症纽);lO份正常外耳道皮肤作为正常组。采用实时荧光RT-PCR与Ljghtcyeler荧光PCR仪 定量检测TLR4、MyD88 mRNA的表达水平;采用2一A ACT法处理实时荧光定量RT-PCR数据。结果炎症组TLR4、MyD88mRNA表达 水平较正常外耳道组分别上升了4倍和3倍,且差异有统计学意义 值均<O.05);炎症组TLR4、MyD88mRNA表达水平较非炎症组 分别上升了2倍和l倍,且差异有统计学意义(尸值均<O.O5)。结论中耳胆脂瘤组织中,尤其是炎症反应明显的胆脂瘤组织,TLR4及 其下游信号转导分子的表达量发生改变,提示TLR4-MyD88信号传导途径可能参与了胆脂瘤型中耳炎的发病。 【关键词】胆脂瘤;中耳;TLR4;MyD88;RT-PCR 中图分类号:R764.21 文献标识码:B 文章编号:1671-8194(2012)07-0026-03 TLR4,MyD88 mRNA in the Expression of Cholesteatoma YANGZhen-zhen,ZHANGLi-ping (DepartmentofOtolaryngology,SecondAilfiatedHospitalofShanxiMedical University,Taiyuan 030001,Chin 【Abstractl Objective To establish a real—time fluorescence quantitativepolymerase chain reaction(PCR)method to detect the expression of TLR4, MyD88 mRNA in human cholesteatoma tissues.Method Twenty—ifve cholesteatoma samples(Inflammation in 1 3 patients of which,1 2 cases of non- ilafnmmato)and ten normal auditory canal skin specimens were enrolled in this study.and expressions of TLR4 nd aMyD88 were determined by reverse transcriptasepolymerase chain reaction(RT-PCR)and the data were nalayzed by the method of 2-AACT.Result Inflammation group TLR4,MyD88mRNA canal group than the normal expression levels△statistically signiifcant <0.O5);inflammation group TLR4,MyD88mRNA expression levels compared with non—inflammatory group were increased 2 times and 1 times,and hte diference was statistically signiifcant(P<O.05).Conclusion The middle era cholesteatoma,especially obvious cholesteatoma ilammatfnion,TLR4 and its downstream sinalg transduction molecules expression changes,suggesting that TLR4一MyD88 signaling pathway may be involved in cholesteatoma of the disease. IKey words】Cholesteatoma;Middle ear;TLR4;MyD88;RT-PCR 尽管中耳胆脂瘤的成因及其上皮的来源仍存在很多争议,但基本 破坏的内在重要因素 。Toll样受体(tol1.1ikereceptors,TLRs)是先 达成共识的是胆脂瘤的形成与机体为防御慢性炎症而产生的一系列 异常免疫应答有关。免疫反应的异常是造成胆脂瘤持续发展和骨质 天性免疫模式识别受体(pattern recognition receptor,PRR)之一,通 过识别病原微生物及其细胞壁产物的特殊结构即病原相关分子模式 2012年3月第10卷第7期 (pathogen associated molecularpatterns,PAMPs)迅速激活天然免疫 系统 。现Szczepanski等 研究发现TLR(TLR-2,TLR-3,TLR-4)在 胆脂瘤微环境中表达丰富,提示TLR4可能参与胆脂瘤型中耳炎的发 病。本实验拟用RT-PCR法观察中耳胆脂瘤组织TLR4的变化及其下 游传导分子MyD88的表达,进一步探讨TLR4信号转导途径在中耳胆 脂瘤发病中的作用。 1材料与方法 1.1标本 中耳炎组标本组织来自山西医科大学第二医院耳鼻咽喉-头颈外科 住院患者35例(男13例,女22例,年龄16 ̄62岁)平均37.12岁,耳流 脓史1个月 ̄30年,平均5.14年;听骨无破坏者8例,破坏1个8例,破坏 24-13例,破坏3个6例。在术中取标本时根据显微镜下所见上皮下基 质炎性反应的程度,取样分为炎症组和非炎症组,其中炎症组13份, 非炎症组l2份。对照组为正常外耳道皮肤组织1O例,亦取自中耳术 中。上述所有标本在显微镜下仔细剔除胆脂瘤鳞屑及其他坏死组织, 置于--80"C冰箱保存,用作RT-PCR ̄测。所有患者术前均行颞骨高分 辨CT检查,术后病理活检均证实为后天继发性胆脂瘤。 1.2主要试剂与仪器 RT-PCR相关试剂(TAKARA公司).引物合成(深圳华大基因研 究所),引物序列如表1。PCR扩增仪为STRATAGENE公司产品。 表l 3种基因的引物序列及产物基因 目的基因 引物序列(5’一3’) PcR产物(bp) 1.3  ̄,RNA制备和逆转录 取组织50rag,加入lmL Trizol,超声匀浆。加入200 L氯仿,剧 烈振荡混匀30s,于4"C 12000rpm离  ̄5min,将上清液移入另--EP管 中,加入等体积异丙醇,室温放置5min,4"C 12000rpm离 t ̄,5min以沉 淀RNA,用70%乙醇lmL洗涤沉淀2次,4℃12000rpm离  ̄2min,EP 管底部可得RNA沉淀,用5O L 0.I%DEPC水溶解后可作为反转录的 模板。eDNA合成按ReverTraAce-a_逆转录酶试剂盒说明完成。 1.4实时定量PCR PCR反应体系为:FastStart Universal SYBR Green Master(ROX) 10laL,上游引物(15uM)O.5t.tL,下游引物(15uM)O.5 L, eDNA 2 L,无DNAse和RNAse的水7 L,共20 L。PCR反应条 件:94"(2预变性10arin,活化Tag酶l 94"(2 15s,60"(260 S,45个循环结 束。荧光定量PCRi ̄取CT(cycle threshold)值。 1.5统计学方法 用2-△ACT法处理实时荧光定量RT-PCR数据,采用SPSS13.0 for windows软件包处理获得的数据,以Explore过程对数据进行探索性分 析,由于实验组标本值2-△ACT不符合正态分布,以非参数秩和检验 进行统计分析。结果以中位数和最大最小值范围来表示,以尸<O.05认 为差异有统计学意义。 2结果 2.1 TLR4水平的改变 炎症组TLR4平均2-△ACT值分别为0.689(O.200,2.050),非炎 症组TLR4平均2-A ACT值分别为0.291(0.020,0.990),正常对照组 TLR4、平均2一A ACT值分别为0.163(O.001,0.990)。见图1。 ・论 著・ 27 TLR4 图1炎症组、非炎症组、正常对照 ̄.TLR4 mRNA的表达 2.2 MyD88水平的改变 炎症组为MyD88平均2一A ACT值0.777(O.320,1.84)l非炎 症组MyD88平均2一A A CT值为0.320(0.01,0.990),正常对照组 MyD88平均2一△AcT值为0.224(0.002,O.990),见图2。 MyD88 图2炎症组、非炎症组、正常对照 ̄.MyD88 mRNA的表达 3讨论 慢性化脓性中耳炎是耳鼻咽喉科一个常见的疾病,胆脂瘤型中耳 炎是中耳慢性化脓性炎的一个类型,发病率占慢性化脓性中耳炎的 20%,它主要以上皮细胞增生、角化上皮脱屑堆积为特征,虽然其不 产生与恶性肿瘤同样的无限增殖,但它可以引发骨破坏,激发蚀骨, 侵略性地侵蚀中耳及内耳的结构,引起严重的颅内并发症,如并不少 见的永久性的听力损失、前庭功能障碍等,严重危害人类健康。大多 数学者把胆脂瘤骨质破坏的机制解释为慢性炎性作用的结果。Suzuki 等 发现,胆脂瘤囊的破裂可引起局部炎症和骨质破坏,并伴随着相 同部位小脓肿的形成,他们还观察到穿孔部位有明显的炎性细胞浸润 和上皮增殖,说明了胆脂瘤骨质破坏与炎症之间的联系。 马鑫 等研究发现,胆脂瘤原发部位的差别对于胆脂瘤的侵袭性 没有明显影响,主要是伴发炎性反应的轻重对于胆脂瘤的预后以及侵 袭性有明显影响,胆脂瘤周围炎性反应越重,侵袭性越强。基于以 上,了解胆脂瘤的炎症反应机制,尤为重要。 1997年,Mcdzhitov等 首次在人类细胞表现TToll样受体,TLR 的发现对免疫学的发展产生了积极而深远的影响。TLR最突出的生物 学功能是促进细胞因子的合成与释放,引发炎性反应。已经有研究发 现在胆脂瘤微环境中,有大量TLR4的表达,本研究根据显微镜下观 察胆脂瘤上皮下基质,将中耳胆脂瘤组分为炎症组和非炎症组,发现 在炎症程度强的组织中,有大量的TLR4表达,而在炎症程度相对较 弱的胆脂瘤组织中,有TLR4的表达,但明显少于炎症组;相比较胆 脂瘤组,正常对照组仅有微量表达。 TLR4识别配体后发生二聚化,二聚体的刺激信号通过胞P ̄Toll/ IL-1 R区(ToI1/IL一1 R domain,TIR)传递给下游的信号分子经过一 系列蛋白级联反应和磷酸化作用,产生炎性反应【8】。目前发现TLR4 信号通路有2条:一条为MyD88依赖信号途径,另一条为MyD88q ̄ 依赖信号途径。在MyD88依赖途径中,TLR4寡聚化后募集含TIR (Toll—interleukin-1receptor)结构域的接头蛋 ̄TIRAP(TIP domain— 28 ・论 著・ March 2012,Vo1.10,No.7 Janssens S.Beyaert R.Role of Toll-like receptors in pathogen containing adaptor protein)和MyD88。然后MyD88下游的接头蛋白 IRAK4(IL-1 receptor—associated kinase一4)、TRAF6(TNF report —recognition[J].Clin Microbiol Rev,2003,16(4):637-646. Szczepanski M,Szyfter W,Jenek R,et a1.Toll-like receptors2,3and4 associated factor 6)和TAK1(TGF口一activated kinase 1)被募集并活 化,而TAK1激活IKK—NF—K B通路和MAPK通路,最终导致前炎性因 子的表达_9】。本实验研究发现,同TLR4一样,MyD88在炎症组中有 大量表达,非炎症组次之,正常对照组有微量表达。说明在胆脂瘤发 生、发展过程中,TLR4一MyD88信号转导途径可能参与了炎眭反应。 (TLR2,TLR3andTLR4)rae expressed in the microenvironment of human acquired cholesteatoma[J].Eur Arch Otorhinolaryngol,2006, 263(7):603—607. 马鑫,余力生,夏瑞明.不同部位胆脂瘤侵袭性免疫组化的比 较[J】_中华耳鼻咽喉头颈外科杂志,2006,41(8):574—578. Suzuki C,Ohtani I.Bone destruction resulting from rup lure of a 本实验结果显示在胆脂瘤中耳炎过程中,胆脂瘤组织内TLR4、 MyD88的表达量随着炎症程度的加重而增多。这有助于对人天然免 疫和获得性免疫启动的认识,并进一步了解TLR4传导通路在胆脂瘤 型中耳炎发病机制中的作用。而且可以为该病的免疫治疗提供理论依 cholesteatoma sac:temporal bone pathology[J].Otol Neur otol, 2004,25(5):674・677. Medzhitov R,Preston—Hurlburt P,Janeway CA.A human homoLogue of the Drosophila Toll protein signal sactivation of adaptiveimm— 据。如:在胆脂瘤发病早期(慢性化脓性中耳炎)时就进行免疫干预 治疗,阻止或延缓疾病的发展。 参考文献 [1]Albino AP,Kimmelman CP,Parisier SC.Cholesteatoma:a molecular and cellularpuzzlel[J].Am J Otol,1998,19(3):266・272. unity[J].Nature,1997,388(6640):394・397. Lu YC,Yeh WC,Ohashi PS.LPS/TLR4 signal transduetion P pathway[J].Cytokine,2008,42(2):145-151. [2】林刃舆,迟放鲁冲耳胆脂瘤形成机理的研究进展[J].国外医学 耳鼻咽喉科学分册,2001,25(3):153-156. 黄宏耀,梁冯,宁勇.Toll样受体介导的信号转导通路及其与炎症 和肿瘤的天系[J].湖北中医学院学报,2008,12(4):34—36. 中药处方分析及其在药学服务中的应用 谢华金 邱芝青 蔡德 陈 宙 (广东医学院附属医院药学部,广东湛江524001) 【摘要】目的探讨中药处方分析及其在药学服务中的应用。方法基于中医药理论,从诊断、疗效和药物功能等多角度分析中药处方分析 的作用。结果中药处方分析在中药调剂、科学煎药以及服药时间和方"TL- ̄方面给患者起指导作用。结论处方分析是药学服务的关键环节, 归纳总结处方分析的应用方法,有助于进一步提供全方位药学服务。 【关键词】中药;处方分析;药学服务 中图分类号:R28 文献标识码:B 文章编号:1671-8194(2012)07-0028-02 Significance of Prescription Analysis in Pharmaceutical Service XTEHua-ifn,QIUZhi-qing,CAIDe,CHENShen (Department ofPharmacy,Afilfiated Hospital ofGuangdong Medical College,Zhanjtang 524000,China) 【Abstractl Objective To explore the signiifcance of Chinese medicine prescirption analysis in pharmaceutical service nd ato provide information for clinical medication of traditional Chinese medicines.Methods Based on theory of Chinese medicine,the importance of prescription analysis were analyzed from aspects of clinical diagnosis,effect as well as the function of drugs etc.Results Patients were ̄,uided with three aspects involved in prescription analysis such as Chinese drugs dispensing,scientiic decoctifng medicine,and time and method of drug administration.Conclusion Prescription analysis plays an important role in pharmaceutical service. 1Key words】Traditional Chinese medicine;Prescription analysis;Pharmaceutical service 随着药学服务工作的开展,中药房的工作不再是简单的药品调 不合格处方分离出来,对中药不合理用药原因进行分析。我院2010年 6B至2011年6B处方分析情况具体见表l。 配,而是为患者理药物治疗提供全方位的药学服务。中药处方既是医 师给中药调剂人员的书面通知,又是中药调剂工作的依据,因此中药 房的处方分析是药学服务中的关键环节。本文旨在探讨中药不合理处 方原因,及处方分析在药学服务中的应用。 1中药处方分析 近年来,全球很多患者死于不合理用药,因此,分析处方,正确 表1 中药处方分析IR&ir-总表 选择并合理使用药物,是提高疗效,降低不良反应,减轻患者负担的 关键,也是临床药学服务的重要任务。我院近年来开始实施对中药处 方的评价工作,每周由专人抽取中药处方20页,对处方的中药用药情 况进行分析、评价、点评并汇总,分析是否存在不合理处方,然后将 2处方分析在药学服务中的应用 

本文标签: TLR4MyD88mRNA在胆脂瘤型中耳炎中的表达