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2024-07-29 作者:
GENMED SCIENTIFICS INC. U.S.A
GMS30010 v.A
GENMED麦黄酮凝胶电泳试剂盒产品说明书(中文版)
主要用途
GENMED麦黄酮凝胶电泳试剂是一种旨在使用麦黄酮替代甘氨酸的凝胶电泳系统,分离小分子多肽和蛋白分子,以弥补传统十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶(SDS-PAGE)电泳不足的权威而经典的技术方法。该技术由大师级科学家精心研制、成功实验证明的。主要适用于分离4 kD至30 kD的小分子蛋白和多肽,包括蛋白亚基,以及疏水蛋白和脂多糖和脂寡糖。产品优异,即到即用,性能稳定,操作方便,分离效果明显,建立标准化体系。
技术背景
传统蛋白电泳分离采用十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶(SDS PAGE)。但是小分子多肽和蛋白分子随着十二烷基硫酸钠(SDS)一起移动,而无法分离。通过使用麦黄酮,同时减少SDS浓度,可以很好地将SDS包裹的小分子蛋白与SDS粒子分开,使样品清晰分离。
产品内容
GENMED分离液(Reagent A)
GENMED促进液(Reagent B)
GENMED凝结液(Reagent C)
GENMED隔离液(Reagent D)
GENMED清理液(Reagent E)
GENMED聚集液(Reagent F)
GENMED上样液(Reagent G)
GENMED阳极液(Reagent H)
GENMED阴极液(Reagent I)
产品说明书
XX毫升
XX微升
XX毫升
XX毫升
XX毫升
XX毫升
XX微升
XX毫升
XX毫升
1 份
保存方式
保存GENMED凝结液(Reagent C)在-20℃冰箱里,其余的保存在4℃冰箱里,GENMED上样液(Reagent
G),避免光照,有效保证3月
用户自备
15毫升锥形离心管:用于配制凝胶的容器
50毫升锥形离心管:用于配制凝胶的容器
1.5毫升离心管:用于样品处理的容器
500毫升三角烧瓶:用于配制电泳液的容器
无离子水:用于稀释电泳液
电泳系统:用于蛋白电泳的装置
1
实验步骤
实验开始前,将所有试剂从冰箱里取出,置于室温下预热,达到室温均衡。然后根据用户电泳槽大小,配制凝胶:
一、 胶底制备
1. 准备1个15毫升锥形离心管
2. 加入XX毫升GENMED分离液(Reagent A)
3. 加入XX微升GENMED促进剂(Reagent B)
4. 再加入XX微升GENMED凝结剂(Reagent C)
5. 即刻摇动瓶身,混匀
6. 用1毫升移液管移入1毫升胶体混匀液到一端准备好的玻璃槽里,避免气泡
7. 用1毫升移液管再移入1毫升胶体混匀液到另一端准备好的玻璃槽里,避免气泡
8. 在室温下,静置15至45分钟,直到胶体凝结
二、 分离胶制备
9. 准备1个50毫升锥形离心管
10.加入XX毫升GENMED分离液(Reagent A)
11.加入XX微升GENMED促进剂(Reagent B)
12.再加入XX微升GENMED凝结剂(Reagent C)
13.即刻摇动瓶身,混匀
14.用25毫升移液管移入30毫升胶体混匀液到一端玻璃槽里,避免气泡(注意:距离玻璃槽顶端2厘米)
15.加入XX毫升GENMED隔离液(Reagent D)
16.在室温下,静置15至45分钟,直到胶体凝结
17.小心倒掉GENMED隔离液(Reagent D)
18.加入XX毫升GENMED清理液(Reagent E),覆盖整个胶体表面
19.小心倒掉GENMED清理液(Reagent E)
20.重复实验步骤18至19二次
三、 聚集胶制备
21.准备1个50毫升锥形离心管
22.加入XX毫升GENMED聚集液(Reagent F)
23.加入XX微升GENMED促进剂(Reagent B)
24.再加入XX微升GENMED凝结剂(Reagent C)
25.即刻摇动瓶身,混匀
26.用25毫升移液管移入15毫升胶体混匀液到一端玻璃槽里,避免气泡
27.插入10孔样品梳,避免气泡
28.在室温下,静置15至45分钟,直到胶体凝结
2
四、 样品处理
29.准备1个1.5毫升离心管
30.移入XX微升待测蛋白样品(注意:蛋白总量为10微克,避免超过20微克)
31.加入XX微升GENMED上样液(Reagent G),混匀
32.放进37℃恒温水槽孵育15分钟
33.上样
五、 电泳运行
34.准备1个500毫升三角烧瓶
35.移取XX毫升GENMED阳极液(Reagent H)到三角烧瓶
36.加入225毫升用户自备的无离子水,混匀
37.加入到电泳槽下槽
38.再准备1个500毫升三角烧瓶
39.移取XX毫升GENMED阴极液(Reagent I)到三角烧瓶
40.加入225毫升用户自备的无离子水,混匀
41.加入到电泳槽上槽
42.插上电源,运行:电压为100伏,运行时间为15小时(15厘米胶长)或直到色带抵达胶体底部(注
意:如果使用200伏,运行时间为5小时左右)
43.拆除电泳装置,取出胶体(注意:胶体易脆裂)
44.考马斯亮蓝染色(注意:建议使用GENMED麦黄酮蛋白电泳考马斯亮蓝染色试剂盒-GMS30003.2)
注意事项
1. 本产品为10次操作(30毫升胶体量)或60次操作(5毫升胶体量)
2. 用户根据具体情况,按比例调整试剂用量,即不同胶体大小按比例调整试剂用量
3. 操作时须戴手套
4. 液体混合后,即刻移入玻璃槽,避免气泡
5. 本产品为16%,分离范围为4至30 kD蛋白分子
6. GENMED分离液(Reagent A)使用前,须摇匀
7. GENMED上样液(Reagent G)为还原型上样液,本公司提供非还原型上样液
8. 蛋白上样量以XX微克/条带为佳,包括标准样
9. 麦黄酮蛋白电泳染色不同于传统考马斯亮蓝染色,建议使用GENMED麦黄酮蛋白电泳考马斯亮蓝染
色试剂盒-GMS30003.2
10.本公司提供系列蛋白电泳产品
质量标准
1. 本产品经鉴定性能稳定
2. 本产品经鉴定分离效果强
使用承诺
杰美基因秉着“信誉至上、客户满意、质量承诺”的宗旨为我们的用户提供优质产品和服务。用户收到货
3
后,应按照产品说明书上的规定妥善保管并在有效期内使用。我们的产品在销售前已作严格的质量鉴定,保证说明书所述的使用效果。在货到后10天内若发现确属本产品的质量问题,请立即以书面形式(实验报告)与本公司联系,并将该产品退回,经检验确系产品质量所致,本公司负责更换产品。如系使用者错误操作所致,本公司不承担由此造成的损失。
友情提醒
IF IT DOESN’T WORK, RECHECK YOUR EXPERIMENT TO SEE WHAT YOU DID WRONG。
订购信息
编号
名称
规格
10次
500毫升
50毫升
50毫升
100毫升
500毫升
500毫升
5毫升
500毫升
500毫升
规格
10毫升
500毫升
GMS30010
GMS30010A
GMS30010B
GMS30010C
GMS30010D
GMS30010E
GMS30010F
GMS30010G
GMS30010H
GMS30010I
产品编号
GMS12006
GMS12007
GMS12017.1
GMS12017.2
GMS12017.3
GMS12017.4
GMS12017.5
GMS12017.6
GMS12017.7
GMS12017.8
GMS12034.1
GMS12034.2
GMS12034.3
GMS12034.4
GMS12034.5
GMS12035.1
GMS12035.2
GMS12075
GMS30010
GMS30012
GMS30071.1
GENMED麦黄酮凝胶电泳试剂盒
GENMED分离液(Reagent A)
GENMED促进液(Reagent B)
GENMED凝结液(Reagent C)
GENMED隔离液(Reagent D)
GENMED清理液(Reagent E)
GENMED聚集液(Reagent F)
GENMED上样液(Reagent G)
GENMED阳极液(Reagent H)
GENMED阴极液(Reagent I)
名称
蛋白电泳2倍样品处理液
蛋白电泳10倍浓缩运行缓冲液
40%ACRYLAMIDE-BIS(19:1)溶液 500毫升
40%ACRYLAMIDE-BIS(29:1)溶液 500毫升
40%ACRYLAMIDE-BIS(37.5:1)溶液 500毫升
30%ACRYLAMIDE-BIS(19:1)溶液 500毫升
30%ACRYLAMIDE-BIS(29:1)溶液 500毫升
30%ACRYLAMIDE-BIS(37.5:1)溶液 500毫升
40%ACRYLAMIDE溶液 500毫升
2%BIS-ACRYLAMIDE溶液 500毫升
3%蛋白电泳聚集预制胶溶液
6%蛋白电泳分离预制胶溶液
8%蛋白电泳分离预制胶溶液
10%蛋白电泳分离预制胶溶液
低分子蛋白标准样 高分子蛋白标准样
等电聚焦蛋白电泳(IEF)上样缓冲液
500毫升
500毫升
500毫升
500毫升
100次
100次
10毫升
15%蛋白电泳分离预制胶溶液 500毫升
麦黄酮(Tricine)蛋白凝胶电泳试剂盒 10次
部分蛋白酶切多肽谱分析试剂盒 10次
基质金属蛋白酶(MMP)明胶酶谱法(zymography)电泳分析试剂盒
5次 4
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