MTHFR基因C677T和A1298C基因多态性与乳腺癌的相关性的初步探讨_百度文

2024-07-29 作者:

现代医院２０１０年３月第１０卷第３期专业技术篇Ｍｏｄｅｍ　Ｈｏｓｐｉｔａｌ　Ｍａｒ　２０１０　Ｖｏｌ　１０　Ｎｏ　３　ＭＴＨＦＲ基因Ｃ６７７Ｔ和Ａ１２９８Ｃ基因多态性与乳腺癌的　相关性的初步探讨　林景泰陈盛强　李卫东　ＳＩＮＧＬＥ　ＮＵＣＬＥＯＴＩＤＥ　Ｐ０ＬＹＭＯＲＰＨｌＳＭＳ　ＩＮ　ＭＥＴＨＹＬＥＮＥＴＥＴＲＡＨＹＤＲＯＦＯＬＡＴＥ　ＲＥＤＵＣ—　ＴＡＳＥ　ＧＥＮＥ　ＡＮＤ　ＳＵＳＣＥＰＴＩＢＩＬＩＴＹ　ＴＯ　ＢＲＥＡＳＴ　ＣＡＮＣＥＲ　ＬＩＮ　Ｊｉｎｔａｉ，ＣＨＥＮ　Ｓｈｅｎｇｑｉａｎｇ，ＬＩ　Ｗｅｉｄｏｎｇ　【摘要】　目的探讨代谢叶酸的亚甲基四氢叶酸还原酶（ＭＴＨＦＲ）基因单核苷酸多态与乳腺癌风险　的关系。方法以聚合酶链反应和限制性片段长度多态方法，分析了６５个乳腺癌病人和１４３个正常对照的　ＭＴＨＦＲ基因Ｃ６７７Ｔ和Ａ１２９８Ｃ基因型及其对乳腺癌风险的相关性。结果ＭＴＨＦＲＣ６７７Ｔ和Ａ１２９８Ｃ基因型　在病例和对照中的分布差异无显著性意义。１２９８变异基因型与６７７变异基因型之间无有协同作用。结论　ＭＴＨＦＲＣ６７７Ｔ和Ａ１２９８Ｃ单核苷酸多态可能与乳腺癌的遗传易感性无关。　【关键词】　ＭＴＨＦＲＣ６７７Ｔ乳腺癌　多态性Ａ１２９８Ｃ　【Ａｂｓｔｒａｃｔ】０ｂｊｅｃｔｉｖｅ　Ｔｏ　ｅｘｐｌｏｒｅ　ｔｈｅ　ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ　ｂｅｔｗｅｅｎ　ｇｅｎｅｔｉｃ　ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍｓ　ｉｎ　ｍｅｔｈｙｌｅｎｅｔｅｔｒａｈｙｄｒｏｆｏ—　ｌａｔｅ　ｒｅｄｕｃｔａｓｅ（ＭＴＨＦＲ），ａ　ｃｅｎｔｒａｌ　ｅｎｚｙｍｅ　ｉｎ　ｆｏｌａｔｅ　ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ　ｔｈａｔ　ａｆｆｅｃｔｓ　ＤＮＡ　ｍｅｔｈｙｌａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，ａｎｄ　ｔｈｅ　ｉｒｓｋ　ｏｆ　Ｂｒｅａｓｔ　Ｃａｎｃｅｒ．Ｍｅｔｈｏｄｓ　Ｇｅｎｏｍｉｃ　ＤＮＡ　ｗａｓ　ｉｓｏｌａｔｅｄ　ｆｒｏｍ　ｔｈｅ　ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌ　ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓ　ｏｆ　６５　ｐａｔｉｅｎｔｓ　ｗｉｔｈ　Ｂｒｅａｓｔ　Ｃａｎｃｅｒ　ａｎｄ　１４３　ｃｏｎｔｒｏｌ　ｓｕｂｊｅｃｔｓ．Ｐｏｌｙｍｅｒｉｓｅ　ｃｈａｉｎ　ｒｅａｃｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｒｅｓｔｉｒｃｔｉｏｎ　ｆｒａｇｍｅｎｔ　ｌｅｎｇｔｈ　ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ　ｗｅｒｅ　ｕｓｅｄ　ｔｏ　ｅｘａｍｉｎｅ　ｔｈｅ　ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍｓ　ｏｆ　ＭＴＨＦＲ　ｇｅｎｅｓ　Ｃ６６７７Ｔ　ａｎｄ　Ａ１２９８Ｃ　ａｎｄ　ｔｈｅ　ｒｅｌａｔｉｏｎ　ｂｅｔｗｅｅｎ　ｔｈｅｓｅ　ｇｅｎｏｔｙｐｅｓ　ａｎｄ　ｒｉｓｋ　ｏｆ　Ｂｒｅａｓｔ　Ｃａｎｃｅｒ　ｗａｓ　ａｎａｌｙｚｅｄ．Ｒｅｓｕｌｔｓ　Ｔｈｅ　ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ　ｏｆ　ＭＴＨＦＲ　Ｃ６７７Ｔ　ａｎｄ　Ａ１２９８Ｃ　ｇｅｎｏｔｙｐｅ　Ｗａｓ　ｎｏｔ　ｓｉｎｎｉｆｉｅａｎｔｌｙ　ｄｉｆｅｒｅｎｔ　ｂｅｔｗｅｅｎ　ｔｈｅ　ｔｗｏ　ｇｒｏｕｐｓ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ　Ｓｉｎｎｌｅ　ｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ　ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ　ｉｎ　ｔｈｅ　ＭＴＨＦＲ　ｇｅｎｅ　ｉｓ　ｎｏｔ　ａ　ｒ一宾　ｉｓｋ　ｆａｃｔｏｒ　ｏｆ　Ｂｒｅａｓｔ　Ｃａｎｃｅｒ．ｔｈｕｓ　ｓｈｏｗｉｎｇ　ｔｈａｔ　ｎｏ　ａ　ｊｏｉｎｔ　ｅｆｆｅｃｔ　ｅｘｉｓｔｓ　ｂｅｔｗｅｅｎ　ｔｈｅ　ＭＴＨＦＲ６７７　ａｎｄ　１２９８　ｐｏｌｙ—　ｍｏｒｐｈｉｓｍｓ一研一一用一一一与一一验一应一　ｏｎ　ｔｈｅ　ｒ　ｉｓｋ　ｏｆ　Ｂｒｅａｓｔ　Ｃａｎｃｅｒ．　【Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ】　Ｂｒｅａｓｔ　Ｃａｎｃｅｒ；Ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ；Ｍｅｔｈｙｌｅｎｅｔｅｔｒａｈｙｄｒｏｆｏｌａｔｅ　ｒｅｄｕｃｔａｓｅ；Ｃ６７７Ｔ；Ａ１２９８Ｃ　【Ａｕｔｈｏｒ　Ｓ　ａｄｄｒｅｓｓ】Ｔｈｅ　ｓｅｃｏｎｄ　ｈｏｓｐｉｔａｌ　ａｆｉｆｌｉａｔｅｄ　ｔｏ　ｇｕａｎｇｚｈｏｕ　ｍｅｄｉｃａｌ　ｃｏｌｌｅｇｅ，Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ，５１０２６０，ＰＲＣ　ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１６７１—３３２Ｘ．２０１０．０３．００７　叶酸的生物学功能是为细胞内甲基化和核苷酸从头合　一究一１，／　　人来自广州医学院附属肿瘤医院，为组织病理学诊断为原发　成提供甲基基团，亚甲基四氢叶酸还原酶（ｍｅｔｈｙｌｅｎｅｔｅｔｒａ—　性乳腺癌的病例。正常对照来自广州地区随机选择的无肿　ｈｙｄｒｏｆｏｌａｔｅｒｅｄｕｃｔａｓｅ，ＭＴＨＦＲ）介导产生５一甲基四氢叶酸，为　瘤病史和体征的健康对照者，根据其年龄和性别与病例进行　蛋氨酸转变成Ｓ一腺苷蛋氨酸提供原料，后者是细胞内各种　频数配对，均为广东籍人。　甲基化反应的通用甲基供体，研究发现，６７７１Ｔｒ基因型者的　１．２研究方法　基因组ＤＮＡ甲基化程度下降，尤其是在叶酸摄入不良者更　１．２．１标本基因组ＤＮＡ的制备使用苯酚一氯仿法抽提。　为显著．乳腺癌是常见的恶性肿瘤，有研究发现，ＭＴＨＦＲ基　１．２．２　ＭＴＨＦＲＣ６７７Ｔ基因和ＭＴＨＦＲＡ１２９８Ｃ多态性的检测　因多态显著增加乳腺癌的风险　。。　，提示叶酸缺乏和／或代　ＭＴＨＦＲＣ６７７ＴＰＣＲ弓Ｉ物序歹　女口下：ｐｌ：５　一ＴＧＡ　ＡＧＧ　谢障碍可能涉及其致癌过程。为此，我们探讨广州地区　ＡＧＡ　ＡＧＧ　ＴＧＴ　ＣＴＧ　ＣＧＧ　ＧＡ一３　．ｐ２：５　一ＡＧＧ　ＡＣＧ　ＧＴＧ　ＭＴＨＦＣ６７７Ｔ和Ａ１２９８Ｃ基因多态性与乳腺癌的关系。　ＣＧＧ　ＴＧＡ　ＧＡＧ　ＴＧ一３　。ＭＴＨＦＲＡ１２９８Ｃ　ＰＣＲ引物序列如　ｌ资料与方法　下：ｐｌ：５　一Ｃ１ＴＴＧＧＧＧＡ—ＧＣＴＧＡＡＧＧＡＣＴＡＣＴＡＣ一３　，ｐ２：　１．１研究对象　５　一ＣＴＩＴＧＧＧＧＡＧＣＴＧＡＡＧＧＡＣＴＡＣＴＡＣＧ一３　。ＰＣＲ扩增均　研究对象包括６５乳腺癌病人和１４３个正常对照。病　在３０　１反应体系中进行，其中包括基因组ＤＮＡ　２　ｔｘｌ，１０　Ｘ　ＰＣＲ　Ｂｕｆｆｅｒ　３　ｐ．１，１０ｍＭｄＮＴＰ　０．５　ｌ，上下游引物各１　Ｉｘｌ（２０　林景泰陈盛强：广州医学院第二附属医院广东广州５１０２６０　ｍ），Ｔａｑ聚合酶０．５　ｔｘｌ，去离子水补足至３０　ｔｘｌ。ＰＣＲ反应　李卫东：广州医学院附属肿瘤医院广东广州５１０３５０　条件为９４℃预变性１０　ｍｉｎ，然后于９４℃３０　Ｓ、６０℃３０　Ｓ、７２℃　１６　现代医院２０１０年３月第１０卷第３期专业技术篇Ｍｏｄｅｍ　Ｈｏｓｐｉｔａｌ　Ｍａｒ　２０１０　Ｖｏｌ　１０　Ｎｏ　３　４５　ｓ，共３０个循环，再于７２℃延伸５　ｍｉｎ。用１．５％琼脂糖　凝胶电泳检测是否有特异性的扩增产物。ＰＣＲ产物分别为　２４６　ｂｐ和１６３　ｂｐ，分别取ＰＣＲ产物１５　ｌ，加１０Ｕ　Ｈｉｎ仃或　Ｍｂｏ　ＩＩ内切酶，１０×酶切缓冲液３　１，加ｄｄＨ　Ｏ补至总体积　３０　ｌ，３７℃酶切６　ｈ。取酶切产物加入４％琼脂糖凝胶中，　于１００　Ｖ电泳３０　ａｒｉｎ后取出，用凝胶分析系统观察电泳结果。　１．３统计方法　表型频率和基因频率采用基因计数法计算。乳腺癌患　者和正常对照组间的比较采用）ｃ　检验。　２结果　２．１　ＭＴＨＦＲＣ６７７Ｔ等位基因的指定　标本经ＰＣＲ／ＲＦＬＰ后可产生３种酶切格局；ＭＴＨ—　ＦＲＣ６７７ＴＦ／Ｔ突变纯合子经Ｈｉｎｆｌ内切酶消化后产生完全酶　切，出现１７４ｂｐ，７２ｂｐ两根条带。ＭＴＨＦＲＣ６７７Ｔ　Ｃ／Ｃ纯合子　型的标本，其ＰＣＲ产物经Ｈｉｎｆｌ内切酶消化后不产生酶切，　则电泳后只出现２４６　ｂｐ一根条带。ＭＴＨＦＲＣ６７７Ｔ杂合子型　经ＨｉｎｆＩ内切酶消化后产生部分酶切，出现２４６　ｂｐ，１７４　ｂｐ，　７２　ｂｐ三根条带。见图ｌ。　１　２　３　４　５　６　７’　８　９　１０　１００ｂｐ　２００ｂｐ　３００ｂｐ　４００ｂｐ　３８８　Ｍ：１００ｂｐ　ｌａｄｄｅｒ；标本３—６、９—１０为ＣＣ型；标本１、７—８为ＣＴ型；标　本２为＿ｒｒ型　图１　ＭＴＨＦＲＣ６７７Ｔ基因Ｈｉｎｆｌ限制性内切酶片断长度多态性分布　２．２　ＭＴＨＦＲ　Ａ１２９８Ｃ等位基因的指定　标本经ＰＣＲ／ＲＦＬＰ后可产生３种酶切格局；ＭＴＨＦＲ　Ａ１２９８Ｃ　Ａ／Ａ型的ＰＣＲ产物有４个Ｍｂｏ　ＩＩ酶切位点，经Ｍｂｏ　ＩＩ内切酶消化后产生５６，３１，３０，２８和１８　ｂｐ　５个片段。ＭＴＨ—　ＦＲ　Ａ１２９８Ｃ　Ｃ／Ｃ纯合子型突变后失去一个酶切位点，其ＰＣＲ　产物经Ｍｂｏ　ＩＩ内切酶消化后产生８４，３１，３Ｏ，１８　ｂｐ　４个片段。　ＭＴＨＦＲ　Ａ１２９８Ｃ　Ａ／Ｃ杂合子型突变后失去一个酶切位点，经　Ｍｂｏ　ＩＩ内切酶消化后产生８４，５６，３１，３０，２８，１８　ｂｐ　６个片段。　见图２、图３。　Ｍ　１　２　３　４　５　６　７　８　１００ｂｐ　２００　ｂｐ　３００　ｂｐ　４００　ｂｐ　５００　ｂｐ　６００ｂｐ　Ｍ：１００　ｂｐ　ｌａｄｄｅｒ；标本１～８号的扩增产物的大小为１６３　ｂｐ　图２　ＭＴＨＦＲＡＩ２９８Ｃ基因ＰＣＲ扩增结果　Ｍ：ＤＮＡ　Ｍａｒｋｅｒ标本；１／３为ＡＣ型，；标本２、４、５、７、８为ＡＡ型；标本　６为ＣＣ型　图３　ＭＴＨＦＲ基因Ａ１２９８ＣＭｂｏ　ＩＩ限制性内切酶片断长度多态性分布　２．３乳腺癌与对照组ＭＴＨＦＲＣ６７７Ｔ基因型频率与等位基　因频率的分布　表１　乳腺癌与对照组ＭＴＨＦＲＣ６７７Ｔ基因型频率与等位基因频率的分布　表１显示病人和对照者两组的ＭＴＨＦＲ基因型频率差　异无显著意义。　２．４乳腺癌与对照组ＭＴＨＦＲ　Ａ１２９８Ｃ基因型频率与等位　基因频率的分布　表２乳腺癌与对照组ＭＴＨＦＲ　Ａ１２９８Ｃ　基因型频率与等位基因频率的分布　表２显示病人和对照者两组的Ａ１２９８Ｃ基因型频率差　异无显著意义。　２．５乳腺癌与对照组ＭＴＨＦＲＣ６７７Ｔ和Ａ１２９８Ｃ联合基因型　频率的分布　表３乳腺癌与照组ＭＴＨＦＲＣ６７７Ｔ和Ａ１２９８Ｃ联合基因型频率的分布　现代医院２０１０年３月第１Ｏ卷第３期专业技术篇Ｍｏｄｅｍ　Ｈｏｓｐｉｔａｌ　Ｍａｒ２０１０　Ｖｏｌ　１０　Ｎｏ　３　１７　表３显示病人和对照者两组的ＭＴＨＦＲＣ６７７Ｔ和　明，ＭＴＨＦＲＡ１２９８Ｃ突变在乳腺癌患者组及正常对照组之间　差异无显著性，ＭＴＨＦＲＡ１２９８Ｃ可能不是中国广东人乳腺癌　Ａ１２９８Ｃ联合基因型频率差异无显著意义。　３讨论　重要的遗传易感因素。这与Ｇａｏ　ＣＭ［　等和Ｍａ　Ｅ等　‘　及　Ｆｅｒｒｏｎｉ　Ｐ　ｃ　等研究结果相同．Ｅｒｉｃｓｏｎ　Ｕ（　等研究表明携带　ＭＴＨＦＲ　６７７ＣＴ／ＴＹ一１２９８ＫＡ的个体增加乳腺癌的发病的风　ＭＴＨＦＲ基因位于１号染色体短臂上（１ｐ３６．３），包括１１　个外显子和１０个内含子，ｃＤＮＡ全长２．２ｋｂ。ＭＴＨＦＲ是机　体一碳基团代谢关键酶，也是甲硫氨酸代谢中的关键酶。目　险性．而我们研究表明ＭＴＨＦＲＣ６７７Ｔ和Ａ１２９８Ｃ的各复合基　因型在乳腺癌组和对照组之间的分布元显著性差异．造成不　同人群乳腺癌与ＭＴＨＦＲ有不同的关联的可能原因有很多，　前已发现ＭＴＨＦＲ近２Ｏ个基因突变位点，其中部分多态位　点的错义突变是导致酶活性降低或缺失和／或热稳定性改变　的主要机制¨　ｊ。目前研究报道较多且与人类疾病关系较　大的多态位点是６７７ｃ—Ｔ和１２９８Ａ－－，．Ｃ。６７７ｃ—Ｔ是ＭＴＨ—　ＦＲ最常见的突变，主要引起酶活性和热稳定性的改变。研　究表明，与ＭＴＨＦＲ基因多态相关联的癌症风险存在一种取　决于叶酸摄入量的基因营养素相互作用　。根据这个假　说，当叶酸摄入充足时，携带ＭＴＨＦＲ变异基因型者的癌症　风险降低，因为在这种情况下既有足够的甲基供体保证正常　甲基化，又由于ＭＴＨＦＲ活性降低抑制５一甲基四氢叶酸形　成的通路，从而增进了ＤＮＡ合成并减少ＤＮＡ损伤的风险。　然而，当叶酸摄人不足时，携带ＭＴＨＦＲ变异基因型的人　ＤＮＡ甲基化和ＤＮＡ合　修复异常成为致癌的主要机制。　有研究报道ＭＴＨＦＲ基因多态与结肠癌、子宫颈原位肿瘤、　乳腺和或卵巢癌风险增加相关。另外在许多人类的肿瘤组　织和癌变的早期阶段都发现有基因组ＤＮＡ的低甲基化现　象，而且此种低甲基化现象常常伴有癌基因如Ｃ—ｍｙｃ和Ｃ　—Ｈａ一瑚的过表达，以及癌基因及抑癌基因如ｐ５３的突变，　它们的发生可能与叶酸缺乏和／或ＭＴＨＦＲ基因多态有关。　另一个分子机制可能是ＭＴＨＦＲ基因多态引起ＤＮＡ损伤增　加和ＤＮＡ修复障碍，从而导致癌变。例如，叶酸缺乏可使人　淋巴细胞ＤＮＡ修复能力下降。　到目前为止，ＭＴＨＦＲ基因多态性与乳腺癌的关系尚无　定论，Ｍａｒｕｔｉ　ＳＳ　等和Ｐｌａｔｅｋ　ＭＥ等发现，６７７Ｔ能够增加乳　腺癌的发病的风险性，Ｇａｏ　ＣＭ等　研究发现６７７１’Ｉ＇基因型　频率在乳腺癌患者和正常对照中的分布差异有显著性。然　而，Ｈｅｎｒｆｑｕｅｚ—Ｈｅｍ６ｎｄｅｚ　ＬＡ等　和Ｍａ　Ｅ等　研究得出了　不周的结论，同样，Ｆｅｒｒｏｎｉ　Ｐ等　的研究表明ＭＴＨＦＲ基因　Ｃ６７７Ｔ多态性也不是乳腺癌的一个危险因素。我们研究结　果表明，ＭＴＨＦＲ　Ｃ６７７Ｔ基因单核苷酸多态可能不是中国广　东人乳腺癌重要的遗传易感因素。　在许多病例中，有可能是几个基因突变相互作用去产生　一个高危险的基因型。这一方面反映出复合基因突变对疾　病影响的复杂性，另一方面也提示我们在研究基因突变对疾　病发病的影响时，不应局限于单基因的分析，还应重视复合　基因型的作用。因此，基因一基因的相互作用有可能是多种　疾病的重要影响因素。如ＭＴＨＦＲ另一个常见多态是　Ａ１２９８Ｃ，该多态也能使ＭＴＨＦＲ活性下降，和Ｃ６７７Ｔ之间存　在着联合作用。Ｓｔｅｖｅｎｓ　Ｖ　Ｌ【　等发现ＭＴＨＦＲ基因Ａ１２９８Ｃ　单核苷酸多态与乳腺癌遗传易感性有关，但我们研究结果表　例如乳腺癌病人选择上的差别还有由于不同人种、饮食习　惯、环境、人的生长状态等因子改变ＭＴＨＦＲ的作用效果等。　由于乳腺癌是一种多基因遗传的疾病，还有许多基因也可能　与乳腺癌易感性有关，提示我们在研究基因突变对疾病发病　的影响时，不应局限于单基因的分析，还应重视其他一碳单　位代谢基因的相互作用　“　。　参考文献　［１】ＭＡＲＵＴＩ　Ｓ　Ｓ，ＵＬＲＩＣＨ　ＣＭ，ＪＵＰＥ　ＥＲ．ＭＴＨＦＲＣ６７７Ｔ　ａｎｄ　ｐｏｓｔ・　ｍｅｎｏｐａｕｓａｌ　ｂｒｅａｓｔ　ｃａｎｃｅｒ　ｒｉｓｋ　ｂｙ　ｉｎｔａｋｅｓ　ｏｆ　ｏｎｅ—ｃａｒｂｏｎ　ｍｅｔａｉｘ￣　ｌｉｓｍ　ｎｕｔｒｉｅｎｔｓ：ａ　ｎｅｓｔｅｄ　ｃａｓｅ—ｃｏｎｔｒｏｌ　ｓｔｕｄｙ［Ｊ］．Ｂｒｅａｓｔ　Ｃａｎｃｅｒ　Ｒｅｓ，２００９，１１（６）：Ｒ９１．　［２］ＧＡＯ　Ｃ　Ｍ，ＫＡＺＵＯ　Ｔ，ＴＡＮＧ　Ｊ　Ｈ．ＭＴＨＦＲ　ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍｓ，ｄｉｅｔａｒｙ　ｆｏｌａｔｅ　ｉｎｔａｋｅ　ａｎｄ　ｒｉｓｋｓ　ｔｏ　ｂｒｅａｓｔ　ｃａｎｃｅｒ［Ｊ］．Ｚｈｏｎｇｈｕａ　Ｙｕ　Ｆａｎｇ　Ｙｉ　Ｘｕｅ　Ｚａ　Ｚｈｉ，２００９，４３（７）：５７６—８０．　［３］ＨＥＮＲＩＩＱＵＥＺ—ＨＥＲＮ／ｔＮＤＥＺ　Ｌ　Ａ，ＭＵＲＩＡＳ—ＲＯＳＡＬＥＳ　Ａ，　ＨＥＲＮＡＮＤＥＺ　ＧＯＮＺＡＬＥＺ　Ａ．Ｇｅｎｅ　ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍｓ　ｉｎ　ＴＹＭＳ，　ＭＴＨＦＲ，ｐ５３　ａｎｄＭＤＲ１　ａｓ　ｒｉｓｋｆａｃｔｏｒｓｆｏｒ　ｂｒｅａｓｔ　ｃａｎｃｅｒ：ａ　ｅａｓｅ—　ｏｃｎｔｒｏｌ　ｓｕｔｄｙ［Ｊ］．Ｏｎｃｏｌ　Ｒｅｐ，２００９，２２（６）：１４２５－３３．　［４］　ＭＡ　Ｅ，ＩＷＡＳＡＫＩ　Ｍ，ＫＯＢＡＹＡＳＨＩ　Ｍ．Ｄｉｅｔａｒｙ　ｉｎｔａｋｅ　ｏｆ　ｆｏｌａｔｅ，ｖｉ－　ｔ￣ｎｉｎ　Ｂ２，ｖｉｔａｍｉｎ　Ｂ６，ｖｉｔａｍｉｎ　Ｂｌ２，ｇｅｎｅｔｉｃ　ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ　ｏｆｒｅｌａｔｅｄ　ｅｎｚｙｍｅｓ．ａｎｄ　ｒｉｓｋ　ｏｆ　ｂｒｅａｓｔ￣ｎｃ，ｅｒ：ａ　ｃａ８ｅ—ｃｏｎｔｒｏｌ　ｓｔｕｄｙ　ｉｎ　Ｊａｐａｎ　［Ｊ］．Ｎｕｔｒ　Ｃａｎｃｅｒ，２ＯＯ９，６１（４）：４４７－５６．　［５］ＦＥＲＲＯＮＩ　Ｐ，ＰＡＬＭＩＲＯＴｒＡ　Ｒ，ＭＡＲＴＩＮＩ　Ｆ．Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｎｔｓ　ｏｆ　ｈｏ－　ｍｏｃｙｓｔｅｉｎｅ　ｌｅｖｅｌｓ　ｉｎ　ｃｏｌｏｒｅｃｔａｌ　ａｎｄ　ｂｒｅａｓｔ　ｃａｎｃｅｒ　ｐａｔｉｅｎｔｓ［Ｊ］．Ａｎｔｉ－　ｃａｎｃｅｌ－Ｒｅｓ，２００９，２９（１Ｏ）：４１３１—８．　【６］ＳＴＥＶＥＮＳ　Ｖ　Ｌ，ＭＣＣＵＬＬＯＵＧＨ　Ｍ　Ｌ，ＰＡＶＬＵＣＫ　Ａ　Ｌ．Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍｓ　ｉｎ　ｏｎｅ—－ｃａｒｂｏｎ　ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ　ｇｅｎｅｓ　ａｎｄ　ｐｏｓｔｍｅｎｏ・・　ｐａｕｓａｌ　ｂｒｅａｓｔ　Ｃｎａｃｅｒ　ｉｎｃｉｄｅｎｃｅ［Ｊ］．Ｃａｎｃｅｒ　Ｅｐｉｄｅｍｉｏｌ　Ｂｉｏｍａｒｋｅｓｒ　Ｐｒｅｙ，２００７，１６（６）：１１４０—７．　［７］　ＥＲＩＣＳＯＮ　Ｕ，ＳＯＮＥＳＴＥＤＴ　Ｅ，ＩＶＡＲＳＳＯＮ　Ｍ　Ｉ．Ｆｏｌａｔｅ　ｉｎｔａｋｅ，　ｍｅｔｈｙｌｅｎｅｔｅｔｒａｈｙｄｒｏｆｏｌａｔｅ　ｒｅｄｕｅｔｓａｅ　ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍｓ，ａｎｄ　ｂｒｅａｓｔ　ｃｎａｃｅｒ　ｉｒｓｋ　ｉｎ　ｗｏｍｅｎ　ｆｒｏｍ　ｔｈｅ　Ｍａｌｍ　Ｄｉｅｔ　ａｎｄ　Ｃａｎｃｅｒ　ｃｏｈｏｒｔ［Ｊ］．　Ｃａｎｃｅｒ　Ｅｐｉｄｅｍｉｏｌ　Ｂｉｏｍａｒｋｅｒｓ　Ｐｒｅｙ，２００９，１８（４）：ｉ１０１—１０．　［８］ＳＵＺＵＫＩ　Ｔ，ＭＡＴＳＵＯ　Ｋ，ＨＩＲＯＳＥ　Ｋ．Ｏｎｅ—Ｃａｒｂｏｎ　ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ—　ｒｅｌａｔｅｄ　ｇｅｎｅ　ｐｏ！ｙｍｏｒｐｈｉｓｍｓ　ｎａｄ　ｉｒｓｋ　ｏｆ　ｂｒｅａｓｔ　ｃａｎｃｅｒ［Ｊ］．Ｃａｒｃｉｎｏ—　ｇｅｎｅｓｉｓ，２００８，２９（２）：３５６—６２．　［９］ＰＬＡＴＥＫ　Ｍ　Ｅ，ＳＨＩＥＬＤＳ　ＰＧ，ＭＡＲＩＡＮ　Ｃ．Ａｌｃｏｈｏｌ　ｃｏｎｓｕｍｐｆｉｏｎ　ａｎｄ　ｇｅｎｅｔｉｃ　ｖａｒｉａｔｉｏｎ　ｉｎ　ｒｅｄｕｃｔｓａｅ　ａｎｄ　５　—－ｍｅｔｈｙｈｅｔｒｂａｙｄｒｏｆｏｌａｔｅ—－ｈｏｍｏｃｙｓｔｅｉｎｅ　ｍｅｔｈｙｌｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ　ｉｎ　ｒｅｌａ－　ｔｉｏｎ　ｔｏ　ｂｒｅａｓｔ　ｃａｎｃｅｒ　ｉｒｓｋ［Ｊ］．Ｃａｎｃｅｒ　Ｅｐｉｄｅｍｉｏｌ　Ｂｉｏｍａｒｋｅｓｒ　Ｐｒｅｙ，　２００９，１８（９）：２４５３—９．