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2024年5月16日发(作者：)
植物叶绿素（chlorophyll）含量试剂盒使用说明
分光光度法
货号：BC0990
规格：50T/48S
产品内容：
提取液：液体100mL×5瓶，4℃保存。
试剂一：粉剂×1瓶，4℃保存。
产品说明：
植物叶绿素广泛存在于绿色植物组织中，其含量与光合作用、营养状况密切相关，是反
应植物生长状况的重要指标。
叶绿素a和叶绿素b在645nm和663nm处有最大吸收，根据经验公式可计算得叶绿素a和叶
绿素b以及总叶绿素含量。
自备实验用品及仪器：
天平、研钵、可见分光光度计、1mL玻璃比色皿、10mL玻璃试管，锡箔纸。
操作步骤：
1.
干净。
2.加入1mL蒸馏水，少量试剂一（约50mg），在黑暗或弱光条件下充分研磨，转入10mL
称取约新鲜植物叶片或其它绿色组织，去掉中脉，称取约0.1g，剪碎，用蒸馏水洗
玻璃试管。
3.用提取液冲洗研钵，将所有冲洗液转入玻璃试管，用提取液定容至10mL，玻璃试管
置于黑暗条件下或者包上锡箔纸浸提3h，观察试管底部组织残渣完全变白则提取完全，若组
织残渣未完全变白，继续浸提至其完全变白。
4.取浸提液1mL于1mL玻璃比色皿，提取液调零，测定663nm和645nm处吸光值，分别记
为A
663
和A
645
。
计算公式：
叶绿素a含量（mg/g）=（12.7×A
663
–2.69×A
645
）×V提×D÷m÷1000
=0.01×（12.7×A
663
–2.69×A
645
）×D÷m
叶绿素b含量（mg/g）=（22.9×A
645
–4.68×A
663
）×V提×D÷m÷1000
=0.01×（22.9×A
645
–4.68×A
663
）×D÷m
叶绿素总含量（mg/g）=（20.21×A
645
+8.02×A
663
）×V提×D÷m÷1000
=0.01×（20.21×A
645
+8.02×A
663
）×D÷m
V提：提取液体积，10mL；D：稀释倍数；m：样本质量，g
注意事项：
1.
2.
3.
4.
叶绿素对光敏感，研磨和提取等操作尽量避光或者在弱光下进行。
一定要浸提至组织残渣完全变白，否则提取不充分。
用提取液冲洗研钵一定要冲洗至所有的绿色物质被转移至玻璃试管。
测定时吸光值超过1，可进行适当稀释。
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