一些含氮有机物在N-氯代丁二酰亚胺-二氯荧光素体系中的后化学发光反应

2024-07-28 作者:

Ｖ０１．３１　２０１０年１月　高等学校化学学报　ＣＨＥＭＩＣＡＬ］ＯＵＲＮＡＬ　ＯＦ　ＣＨＩＮＥＳＥ　ＵＮＩＶＥＲＳＩＴＩＥＳ　Ｎｏ．１　５１～５６　一些含氮有机物在Ⅳ－氯代丁二酰亚胺・　二氯荧光素体系中的后化学发光反应　张慧忠　，聂　菲　一，吕九如　（１．陕西师范大学化学与材料科学学院，陕西省生命分析化学重点实验室，西安７１００６２；　２．西北大学分析科学研究所，西安７１００６９）　摘要研究了５３种含氮有机物在』、『一氯代丁二酰亚胺（ＮＣＳ）一二氯荧光素体系中的后化学发光行为，结果发　现，很多物质在ＮＣＳ一二氯荧光素体系中都具有后化学发光活性．经过结构分析发现，这类物质有无后化学　发光活性以及后化学发光活性的强弱主要与其分子结构中Ｎ原子的状态有关．在对有关反应的动力学性质、　化学发光光谱及有关物质荧光光谱的研究基础上，提出了这类后化学发光反应的可能机理．　关键词后化学发光；Ｎ．氯代丁二酰亚胺；＝氯荧光素；含氮有机物　０６５２．７　文献标识码Ａ　文章编号０２５１－０７９０（２０１０）叭－００５１－０６　中图分类号化学发光分析以其灵敏度高、线性范围宽、分析速度快、仪器简单以及易于实现自动化等诸多优　点，受到分析工作者的广泛关注，已被成功地应用于药学、分子生物学、临床医学、生命科学和环境科　学等领域中的许多重要的无机物和有机物的痕量和超痕量分析，成为当前分子光谱分析中比较活跃的　研究领域　～　．目前，化学发光分析研究的一个主要方面就是寻找新的化学发光反应体系，以扩大化　学发光分析的应用范围．我们曾报道过一种新的化学发光反应——后化学发光反应　一　．最近的研究　表明，一些荧光试剂可以用作化学发光试剂，并且具有许多奇特的性质ｕ　．本文以二氯荧光素为化　学发光试剂，考察了５３种含氮有机物在Ⅳ一氯代丁二酰亚胺（ＮＣＳ）一二氯荧光素体系中的后化学发光行　为．其中大部分化合物在该体系中能够引发后化学发光反应，而后化学发光活性与其分子结构中Ｎ原　子的状态有关．一般含叔胺基和仲胺基的有机物具有后化学发光活性，其中叔胺基的活性高于仲胺　基；含伯胺的有机物以及氮原子的邻位原子有双键或氮原子本身有双键的有机物没有后化学发光活　性．通过对反应动力学性质、化学发光光谱及荧光光谱的研究，提出了后化学发光反应的机理．在选　择的实验条件下，给出了相应物质的分析参数，评估了将ＮＣＳ一二氯荧光素体系的后化学发光反应用于　对多种含氮化合物进行化学发光分析的可行性．从而，在理论和应用的结合上构建了一个新的化学发　光分析体系——Ｎｃｓ　二氯荧光素后化学发光分析体系．　　。１　实验部分　１．１仪器与试剂　ＩＦＦＭ—Ｄ流动注射化学发光光谱分析仪（西安瑞迈电子科技有限公司）；９７０ＣＲＴ荧光分光光度计　（上海分析仪器总厂）；ＴＵ．１９０１紫外一可见分光光度计（北京通用仪器有限公司）．　含氮化合物标准溶液（１．００×１０　ｇ／ｍＬ）的配制：称取０．０１００　ｇ含氮化合物（对照品为中国药品　生物制品检定所产品），置于５０　ｍＬ烧杯中，加少量水溶解后，定容于１００　ｍＬ容量瓶中，使用时用水　逐级稀释至所需浓度．二氯荧光素储备液（１．０×１０　ｍｏｌ／Ｌ）的配制：称取２．０　ｇ二氯荧光素（分析纯，　北京化学试剂厂），加入１０　ｍＬ　０．０３　ｍｏｌ／Ｌ　ＮａＯＨ溶解并用水定容至５００　ｍＬ，作为贮备液，使用时用　０．０３　ｍｏｌ／Ｌ　ＮａＯＨ稀释至８．０×１０一ｍｏｌ／Ｌ．ＮＣＳ溶液（０．０５０　ｍｏｌ／Ｌ）的配制：称取０．６７　ｇ　ＮＣＳ（山东天　宇化工有限公司）于１００　ｍＬ容量瓶中加水溶解并定容，使用时配制．实验所用试剂除特别注明外均为　收稿日期：２００９－０４￣１．　联系人简介：吕九如，男，教授，博士生导师，从事化学发光分析研究．Ｅ—ｍａｉｌ：ｌｊｒ＠ｓｎｎｕ．ｅｄｏ．ｅｎ　５２　高等学校化学学报　分析纯，实验用水均为二次去离子水．　Ｐ１　１．２实验方法　流动注射化学发光分析系统的流　路如图１所示．首先将ＮＣＳ溶液与二　氯荧光素溶液混合，在反应管Ｌ中充　分反应，然后，将充分反应后的ＮＣＳ一　二氯荧光素溶液通过六通阀注入水载　Ｆｉｇ．１　Ｓｃｈｅｍａｔｉｃ　ｄｉａｇｒａｍ　ｏｆ　ｃｈｅｍｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｃｅ　ｆｌｏｗ　ｓｙｓｔｅｍ　ａ．ＮＣＳ　ｓｏｌｕｔｉｏｎ；ｂ．ｄｉｃｈｌｏｒｏ—ｌｆｕｏｒｅｓｃｅｉｎ　ｓｏｌｕｔｉｏｎ（０．０３　ｍｏｌ／Ｌ　ＮａＯＨ）；　流中，再与样品溶液混合并反应，产　ｅ．Ｈ２０；ｄ．ｓａｍｐｌｅ　ｓｏｌｕｔｉｏｎ；Ｐ１，Ｐ２．ｐｅｒｉｓｔａｌｔｉｃ　ｐｕｍｐ；Ｌ．ｍｉｘｉｎｇ　ｔｕｂｅ；　生后化学发光．记录化学发光信号，　Ｖ．ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ　ｖａｌｖｅ；Ｗ．ｗａｓｔｅ；Ｆ．ｆｌｏｗ　ｃｅｌｌ；ＨＶ．ｈｉｇｈ　ｖｏｌｔａｇｅ；ＰＭＴ．　以△，定量（ＡＩ＝，　一，０）．　ｐｈｏｔｏｍｕｈｉｐｌｉｅｒ　ｔｕｂｅ；Ｒ．ｒｅｃｏｒｄｅｒ；Ａ．ａｍｐｌｉｉｆｅｒ．　２结果与讨论　２．１实验条件的优化　用１．０×１０　ｇ／ｍＬ盐酸氯丙嗪溶液对流路、反应管长度、溶液流速、反应介质的碱度、二氯荧光　素的浓度以及ＮＣＳ的浓度等进行条件优化．结果表明，用水作载流，使用图１所示的流路，可以使　ＮＣＳ－二氯荧光素反应后的溶液与样品溶液充分混合，能得到最强的后化学发光信号．　为了使ＮＣＳ和二氯荧光素的反应充分进行，在ＮＣＳ与二氯荧光溶液的混合点和进样阀之间连接　了混合管Ｌ（内径０．８　ｍｍ）．若混合管太短，则ＮＣＳ和二氯荧光素反应不充分，基线较高且后化学发光　信号较小，信噪比较低；若混合管太长，则会因发光体浓度衰减而导致后化学发光信号降低，且影响　分析效率．固定流速为１．２　ｍＬ／ｍｉｎ，在１５～１８０　ｃｍ范围内对混合管的长度进行了选择．结果表明，当　反应管Ｌ的长度为１３０　ｃｍ时，具有最大的信噪比．　在反应中，反应介质的碱度通过改变二氯荧光素溶液中ＮａＯＨ的浓度（０．０００１—０．５　ｍｏｌ／Ｌ）加以调　节．结果表明，ＮａＯＨ的浓度为０．０３　ｍｏ］／Ｌ时，后化学发光信号最大，信噪比最高．　对不同浓度组合的二氯荧光素（１．０×１０～一３．０×１０　ｍｏＬ／Ｌ）和ＮＣＳ（０．０１～０．１　ｍｏｌ／Ｌ）对化学发　光反应的影响进行了比较．结果表明，当二氯荧光素的浓度为８．０×１０　ｍｏｌ／Ｌ及ＮＣＳ浓度为０．０５　ｍｏｌ／Ｌ时，反应具有最大的化学发光信号和最高的信噪比．　２．２各种含氮有机物的后化学发光行为　考察５３种含氮有机物在ＮＣＳ－二氯荧光素体系中后化学发光的情况．检出具有后化学发光活性的　化合物列于表１；５３种化合物结构见Ｓｃｈｅｍｅ　１和Ｓｃｈｅｍｅ　２．　从表１中的数据及相关物质的结构可见，在ＮＣＳ．二氯荧光素体系中，含氮有机物的后化学发光活　性取决于物质分子中的含氮基团．含氮基团与物质后化学发光活性关系的一般规律为：（１）含叔胺基　和仲胺基的有机物具有后化学发光活性，其中含叔胺基有机物的后化学发光活性高于含仲胺基的有机　物；含伯胺基的有机物没有后化学发光活性．硫酸特布他林含有仲胺基，但是没有后化学发光活性．　这可能是Ｎ的邻位碳上的官能团的空间位阻较大的缘故．（２）氮原子的邻位原子有双键或氮原子本身　有双键的含氮基团如酰胺基、咪唑基，吡啶基、呱基等一般没有后化学发光活性．盐酸吗啉胍例外，它　的含氮基团是呱基，但却有较弱的后化学发光活性．　在ＮＣＳ一二氯荧光素体系中具有后化学发光活性的含氮有机物，尤其是含叔胺基的有机物具有较　宽的线性范围和较低的检出限．因此，后化学发光体系有望用于这类物质灵敏的化学发光分析．　２．３后化学发光反应的机理探讨　２．３．１　化学发光反应的动力学性质　利用ＩＦＦＳ—Ａ多功能化学发光检测器的静态测量系统研究了　ＮＣＳ一二氯荧光素化学发光反应及盐酸氯丙嗪在ＮＣＳ一二氯荧光素体系中后化学发光反应的动力学性质　（图２）．将１．０　ｍＬ　０．０５　ｍｏｌ／Ｌ　ＮＣＳ溶液注入到１．０　ｍＬ　８．０×１０　ｍｏｌ／Ｌ二氯荧光素溶液（０．０３　ｍｏｌ／Ｌ　ＮａＯＨ）中，立即发生了化学发光反应，检测到化学发光信号（峰１），２００　Ｓ后反应结束，化学发光信号　回落至基线．此时，向上述反应混合液中注入１．０　ｍＬ　１．０×１０　ｇ／ｍＬ盐酸氯丙嗪，又引发一个新的、　Ｎｏ．１　张慧忠等：一些含氮有机物在Ⅳ一氯代丁二酰亚胺一二氯荧光素体系中的后化学发光反应　５３　Ｎ～　Ｎ　Ｌ＼，　～—　Ｈ　ｃＦ　・２Ｈａ　Ｆｌｕｐｈｅｎａｚｉｎｅ　ｈ３　ｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ（１）　Ｔｈｉｏｒｉｄａｚｉｎｅ　ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ（２）　Ｃｈｌｏｒｐｒｏｍａｚｉｎｅ（３）Ｐｅｒｐｈｅｎａｚｉｎｅ（４）　八Ｎ／、］　、ｃ　ｃ　Ｔｒｉｆｌｕｏｐｅｒａｚｍｅ（５）　Ｏｆｌｏｘａｃｉｎ（６）Ｌｅｖｏｆｌｏｘａｃｉｎ　ｈ３　ｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ（７）　Ｂｅｎｚｈｅｘｏｌ（８）Ｄｉｆｅｎｉｄｏｌ　ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ（９）　Ｈ：　ｃ　。一　＂－Ｈ３ＰＯ“３　Ｈ：Ｏ　Ｃ　Ｈ３　Ｂｒｏｍｈｅｘｉｎｅ　ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ（１０）　［ｔｏｐｒｉｄｅ（１　１）　Ｍｏｓａｐｒｉｄｅ　ｃｉｔｒｉｃ　ａｃｉｄ（１　２）　Ｃｏｄｅｉｎｅ　ｐｈｏｓｐｈａｔｅ（１３）　Ｈａ　Ｃｌｏｐｅｒａｓｔｉｎｉ（１４）　Ａｔｒｏｐｉｎｅ（１５）Ｄｉｍｅｎｈ５　ｄｒｉｎａｔｅ（１６）Ｔｒｉｐｒｏｌｉｄｉｎｅ　ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ（１７）　Ｓｃｈｅｍｅ　１　Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓ　ｏｆ　ａｍｉｎｅｓ　１一ｌ７　５４　高等学校化学学报　Ｖｏ１．３１　Ｃｅｔｉｒｉｚｉｎｅ　ｈｙｄｒｏｃｈｌ０ｒｉｄｅ（１８）Ｔｅｒｒａｍｙｃｉｎ（１９）　Ｓｕｌｐｉｒｉｄｅ（２０）　Ｒａｎｉｔｉｄｉｎｅ（２１）　Ｃｈｌｏｒｐｈ＇ｅｎｉｒａｍｍｅ　ｍａｌｅａｔｅ（２２）　Ｋｅｔｏｔｉｆｅｎ　ｆｕｍａｒａｔｅ（２３）Ｔａｍｏｘｉｆｅｎ　ｃｉｔｒａｔｅ（２４）Ｐｈｅｎｏｘｙｂｅｎｚａｍｍｅ（２５）　Ｖｅｒａｐａｍｉｌ（２６）Ｐｅｎｔｏｘｙｖｅｒｉｎｅ　ｃｉｔｒａｔｅ（２７）ＮＨ　ＮＨ　Ｌｏｐｅｒａｍｉｄｅ（２８）　Ｈ　Ｃｙｐｒｏｈｅｐｔａｄｉｎｅ（２９）　Ｆ　Ｈ　、　ＨＯ／　、ＯＨ　△　Ｂｅｎｐｒｏｐｅｆｉｎｅ　ｐｈｏｓｐｈａｔｅ（３０）　Ｍｏｒｏｘｙｄｉｎｅ（３１）　ＮＩｔ２　　ＩＧａｔｉｆｌｏｘａｃｉｎ（３２）　Ｃｉｐｒｏｆｌｏｘａｃｉｎ（３３）　ＮＨｇＣＨ２ＣＯＯＨ　Ｓｉｓｏｍｉｃｉｎ（３４）　Ａｃｉｃｌｏｖｉｒ（３５）　Ｉｓｏｎｉａｚｉｄ（３６）　Ａｍｉｎｏａｃｅｔｉｃ　ａｃｉｄ（３７）　ｙ　－　Ｎ－Ｏ　ｏ　ＯＨ　、　—　ｏ　ＯＨ　ＣｅｆｉｘｉｍｅＯ９）　ＯＨ　Ｈ　Ｈ　ｓ—Ｈ惑Ｈ　黼　Ｎ＼　｛Ｎ２　ＶＮ＼　鼻　０　Ｃｉｍｅｔｉｄｉｎｅ（４０）Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｏｔｈｉａｚｉｄｅ（４１）　Ｍｅｔｆｏｒｍｉｎ（４２）　ＨＮ蠹＇％Ｃ￣Ｏ　０　Ｎ　丫ＮＨ２　Ｓ＼　ｓ／　八　ＮＩ－Ｎ２　？　／ＮＩ－２　Ｆａｍｏｔｉｄｍｅ（４６）　Ｄｉｐｙｒｉｄａｍｏｌｅ（４３）Ｔｈｅｏｐｈｙｌｌｉｎｅ（４４）　Ｅｎｎｌａｐｒｉｌ　ｍａｌｅａｔｅ（４５）　Ｏ　ＮＨ２　Ｈ３Ｃ．￣口。　ｕ，、￣　ＣＨ３　Ｃａｒｂａｍａｚｅｐｉｎｅ（４７）　Ｂｉｓａｃｏｄｙｌ（４８）Ｄｉｃｌｏｆｅｎａｃ　ｓｏｄｉｕｍ（４９）　Ｅｓｔａｚｏｌａｍ（５０）　ＨＯ　－３Ｈｚｏ　Ｃｏｌｃｈｉｃｍｅ（５１）　Ａｍｏｘｉｃｉｌｌｉｎ（５２）　Ｓｃｈｅｍｅ　２　Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓ　ｏｆ　ａｍｉｎｅｓ　１８—　３　Ｂｅｒｂｅｒｍｅ（５３）　很强的化学发光反应（峰２），４００　Ｓ后，反应结束，化学发光信号再次回落至基线．在同样条件下，用　空白溶液代替盐酸氯丙嗪溶液进行试验，未检测到后一个化学发光信号．结果表明，ＮＣＳ和二氯荧光　素能发生化学发光反应，盐酸氯丙嗪在ＮＣＳ－二氯荧光素体系中引发的是后化学发光反应．　用其它具有后化学发光行为物质进行实验，与上述结果类似．　２．３．２化学发光反应的发光体用改装的９７０ＣＲＴ荧光分光光度计绘制了ＮＣＳ一二氯荧光素发光反应　Ｎｏ．１　张慧忠等：一些含氮有机物在，ｖ一氯代丁二酰亚胺一二氯荧光素体系中的后化学发光反应　５５　当　一　Ｕ　Ｕ　Ｆｉｇ・２　Ｋｉｎｅｔｉｃ　ｃｕｒｖｅ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｃｈｅｍｉｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｃｅ（ＣＬ）　ｒｅａｃｔｉｏｎｓ　Ｆｉｇ．３　ＣＬ　ｓｐｅｃｔｒａ　ｏｆ　ＮＣＳ－ｄｉｃｈｉｏｒｏ—ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｉｎ－　ｃｈｌｏｒｐｒｏｍａｚｉｎｅ　ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ　ｒｅａｃｔｉｏｎ　Ｐｅａｋ　１：Ｉｎｊｅｃｔｉｎｇ　０．０５　ｍｏｌ／Ｌ　ＮＣＳ　ｓｏｌｕｔｉｏｎ　ｉｎｔｏ　Ｉ．０　ｍＬ　ｄｉｃｈｌｏｒｏ一　（ａ）ａｎｄ　ＮＣＳ—ｄｉｃｈｌｏｒｏ・ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｉｎ　ｒｅａｃ・　ｌｆｕｏｒｅｓｃｅｉｎ　ｓ０ｌｕｔｉ０ｎ　０ｆ　８．０×１０～ｍｏｌ／Ｌ　ｓｏｌｕｔｉｏｎ；ｐｅａｋ　２：ｉｎｊｅｃ—ｉｒｎｇ　１．０　ｍＬ　ｏｆ　１．０×１０一ｇ／ｍＩ　ｃｈｌｏｒｐｒｏｍａｚｉｎｅ　ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ　ＳＯ—　ｌｕｔｉｏｎ　ｉｎｔｏ　ｔｈｅ　ａｂｏｖｅ　ｒｅａｃｔｉｏｎ　ｍｉｘｔｕｒｅ　ｓｏｌｕｔｉｏｎ．　ｔｉｏｎ（西１　和盐酸氯丙嗪在此体系中后化学发光反应的化学发光光谱（图３）．可以看出，２个反应的化学发光谱　轮廓相似，最大化学发光波长均为５４６．１　ｎｍ．由此可见，后化学发光反应与ＮＣＳ一二氯荧光素化学发光　反应具有相同的发光体．　二氯荧光素（０．０３　ｍｏｌ／Ｌ氢氧化钠）溶液的荧光光谱的最大发射波长为５２４．６　ｎｍ，可以断定ＮＣＳ一　二氯荧光素反应及盐酸氯丙嗪在ＮＣＳ．二氯荧光素体系中后化学发光反应的发光体不是二氯荧光素。　在２００～８００　ａｍ范围内对ＮＣＳ一盐酸氯丙嗪反应产物进行扫描，结果没有观察到荧光发射，这表明其后　化学发光反应的发光体也不是ＮＣＳ．盐酸氯丙嗪反应产物．ＮＣＳ．二氯荧光素反应产物和ＮＣＳ一二氯荧光　素一盐酸氯丙嗪反应产物的荧光光谱（图４）表明，二者的最大荧光发射波长均为５４６．１　ｎｍ，与其反应的　最大化学发光波长相同，而５２４．６　ｎｍ处没有出现二氯荧光素的特征荧光峰．这说明在ＮＣＳ一二氯荧光　素反应中，二氯荧光素被ＮＣＳ完全氧化，反应产生的中间体可能是其化学发光反应的发光体．此中间　体也应是盐酸氯丙嗪在ＮＣＳ一二氯荧光素体系中后化学发光反应的发光体．连续测定ＮＣＳ．二氯荧光素　反应混合物的荧光光谱（图５），结果发现，随着反应时间的延长，５４６．１　ｎｍ处的荧光峰逐渐降低，１０　ａｒｉｎ后，完全消失，这表明此发光体是不稳定的．　量　０　ａ　２　０　三　山　．Ｆｉｇ．４　Ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ　ｓｐｅｃｔｒａ　ｏｆ　ＮＣＳ－ｄｉｃｈｌｏｒｏ－　ｌｕｏｒｅｓｃｅｉｆｎ　ｒｅａｃｔｉｏｎ　Ｆｉｇ．５　Ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ　ｓｐｅｃｔｒａ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｐｒｏｄｕｃｔｓ　ａｔ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｔｉｍｅ　。．［ＮＣＳ（０．０５　ｍｏｌ／Ｌ）＋ｄｉｅｈｌｏｒｏ—ｌｆｕｏｒｅｓｃｅｉｎ（８．０×１０一　ｍｏｌ／　ＮＣＳ（０．０５　ｍｏｌ／Ｌ）＋ｅｈｌｏｒｐｒｏｍａｚｉｎｅ　ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅｆ　８．０×１０一　ｍｏｌ／ｍＬ）　ｒｅａｃｔｉｏｎ．　ｍＬ）］＋ｅｈｌｏｒｐｒｏｍａｚｉｎｅ　ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ（１．０×１０　ｇ／ｍＬ）；　ｂ．ＮＣＳ（０．０５　ｍｏＬ／Ｌ）＋ｄｉｃｈｌｏｒｏ．ｆｌｕｏｒｅｓｅｅｉｎ（８．０×１０一　ｍｏｌｆｍＬ）．　在ＮＣＳ．二氯荧光素体系中用枸橼酸喷托维林和盐酸洛哌丁胺进行实验，得到了同样的结果．可以　推测，其它具有后化学发光活性的含氮有机物都能被ＮＣＳ氧化，其后化学发光反应都有相同的发光　体——Ｎｃｓ．二氯荧光素反应的中问产物．　２．３．３后化学发光反应可能的机理　在碱性条件下，ＮＣＳ水解产生具有氧化能力的次氯酸　；二氯　高等学校化学学报　Ｖｏｌ＿３ｌ　荧光素被次氯酸氧化并且产生激发态的中间产物，当激发态的中间产物回到基态时，发出５４６．１　ｎｍ的　化学发光；当向充分反应后的溶液中加入分析物时，溶液中剩余的次氯酸氧化分析物并释放一定的能　量，溶液中存在的中间产物吸收能量，再次被激发，激发态的中间产物回到基态时产生了后化学发光．　反应式如下：ＮＣＳ＋ＯＨ一　ＮＨＳ＋Ｃ１０一，Ｃ１０一＋Ｄｉｃｈｌｏｒｏｆｌｕｏｒｅｓｃｅｉｎ　Ｅｎｅ　ｇｙ（Ｅ），Ｅ＋Ｐ—｝Ｐ　Ｐｒｏｄｕｃｔ　（Ｐ　），Ｐ　Ｐ＋　（Ａｍａｘ＝５４６．１　ｎｍ），Ｃ１０一＋Ａｎａｌｙｔｅ　Ｐ＋　（Ａ…＝５４６．１　ｎｍ）．　综上，构建的ＮＣＳ一二氯荧光素一含氮有机物后化学发光新体系对于丰富化学发光分析研究的内容　以及扩大化学发光分析的应用范围都有一定的意义．　参考文献　ＨＥ　Ｚｈｉ—Ｋｅ（何治柯），ＬＵＯ　Ｑｉｎｇ—Ｙａｏ（罗庆尧），ＺＥＮＧ　Ｙｕｎ—Ｅ（曾云锷）　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔａｌ　Ａｎａｌｙｓｉｓ（分析测试学报）［Ｊ］　１９９７，１６（１）：７２—８４　［２］　ＧＵＯ　Ｌｉ－Ｌｉ（郭丽丽），ＸＵ　Ｃｈｕｎ—Ｌｉ（许春丽），ＬＩ　Ｂａｏ．Ｘｉｎ（李保新），ｅｔ　ａ１．　Ｃｈｅｍ．Ｊ．Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｉｅｓ（高等学校化学学报）［Ｊ］　２００７，２８（６）：１ｏ４３一ｌｏ４８　［３］ＸＵＥ　Ｂｉｎｇ－Ｃｈｕｎ（薛冰纯），ＷＡＮＧ　Ｔａｏ（王滔），ＬＩＵ　Ｅｒ—Ｂａｏ（刘二保）．Ｓｐｅｃｔｒｏｓｃｏｐｙ　ａｎｄ　Ｓｐｅｃｔｒａｌ　Ａｎａｌｙｓｉｓ（光谱学与光谱分析）［Ｊ］，　２００６，２６（５）：８１６—８２Ｏ　［４］Ｚｈａｎｇ　Ｑ．Ｌ．，Ｌｉ　Ｊ．，Ｍａ　Ｔ．Ｔ．，ｅｔ　ａ１．．Ｆｏｏｄ　Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ［Ｊ］，２００８，１１１（２）：４９８－＿５０２　［５］Ｇｉｕｓｅｐｐｅ　Ｌ．，Ａｎａ　Ｍ．Ｇ．Ｃ．，Ｊｏｒｇｅ　Ｊ．ｓ．Ｃ．，ｅｔ　ａ１．．Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ　ａｎｄ　Ｂｉｏｍｅｄｉｃａｌ　Ａｎａｌｙｓｉｓ［Ｊ］，２００８，４６（２）：３８１－３８５　［６］Ｃｈｅｎ　Ｊ．，Ｂａｉ　Ｊ．．Ｓｐｅｅｔｒｏｃｈｉｍｉｅａ　Ａｃｔａ，Ｐａｒｔ　Ａ［Ｊ］，２００８，７１（３）：９８９－－９９２　［７］ｗｕ　Ｄａｎ—Ｎｉｎｇ，ＡＮＧ　Ｘｕ，ＬＩＮ　Ｊｉｎ—Ｍｉｎｇ．Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｊ．Ｃｈｅｍ．［Ｊ］，２００６，２４（１）：６５—７１　［８］ＤＵ　Ｊｉａｎ　Ｘｉｕ（杜建修），ＬＩＵ　ｗｅｎ—Ｘｉａ（刘文侠），ＬＵ　Ｊｉｕ—Ｒｕ（吕九如）．Ａｃｔａ　Ｃｈｍｉｃａ　Ｓｉｎｉｃａ（化学学报）［Ｊ］，２００４，６２（１４）：１３２３一　ｌ３２６　［９］ＬＩＵ　Ｑｉｎｇ－Ｈｕｉ（刘清慧），叫Ｊｉｕ—Ｒｕ（吕九如），ＦＥＮＧ　Ｎａ（冯娜）．Ｃｈｅｍ．Ｊ．Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｉｅｓ（高等学校化学学报）［Ｊ］，２００６，　２７（６）：１０３６－－１０４１　［１０］ＭＡ　Ｍｉｎｇ－Ｙａｎｇ（马明阳），Ｌ０　Ｊｉｕ—Ｒｕ（吕九如）．Ｃｈｅｍ．Ｊ．Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｉｅｓ（高等学校化学学报）［Ｊ］，２００７，２８（３）：４３６—４＿４０　［１１］Ｓｕｎ　Ｓ．Ｗ．，Ｌｕ　Ｊ．Ｒ．．Ａｎａ１．Ｃｈｉｍ．Ａｃｔａ［Ｊ］，２００６，５８０：９—１３　［１２］Ｎｉｅ　Ｆ．，Ｌｕ　Ｊ．Ｒ．．Ａｎａ１．Ｃｈｉｍ．Ａｃｔａ［Ｊ］，２００７，５９２：ｌ６８—１７２　［１３］Ｎｉｅ　Ｆ．，Ｌｕ　Ｊ．Ｒ．．Ｔａｌａｎｔａ［Ｊ］，２００８，７４：１２４２—１２４６　［１４］ＬＩＵ　Ｒｕｉ－Ｘｉａ（刘瑞霞），Ｌ０　Ｊｉｕ—Ｒｕ（吕九如）．Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｊ．Ａｎａｌｙｔｉｃａｌ　Ｃｈｅｍｉｓｔｙ（分析化学）［Ｊ］．２００９，３７（２）：２６７—２７０　ｒ［１５］Ｍｓａｎｅｈ　Ｓ．，Ｍｏｈａｍｍａｄ　Ａ．Ｋ．．Ｔａｌａｎｔａ［Ｊ］，２００２，５７（３）：４９１＿５００　Ｐｏｓｔ－ｃｈｅｍｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｃｅ　Ｒｅａｃｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｓｏｍｅ　Ｎｉｔｒｏｇｅｎｏｕｓ　Ｏｒｇａｎｉｃ　Ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ　ｉｎ　ｔｈｅ　Ｎ—Ｃｈｌｏｒｏｓｕｃｃｉｉｍｉｎｄｅ－・ｄｉｃｈｌｏｒｏｆｌｕｏｒｅｓｃｅｉｎ　Ｓｙｓｔｅｍ　ＺＨＡＮＧ　Ｈｕｉ．Ｚｈｏｎｇ　，ＮＩＥ　Ｆｅｉ　，ＬＩ３　Ｊｉｕ．Ｒｕ　（１．Ｓｃｈｏｏｌ　ｏｆＣｈｅｍｉｓｔｒｙ　ａｎｄ　Ｍａｔｅｒｉａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅ，Ｓｈａａｎｘｉ　Ｎｏｒｍａｌ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｘｉ　ａｎ　７１００６２，Ｃｈｉｎａ；　２．Ｉｒ￣ｔｉｔｕｔｅ　ｏｆＡｎａｌｙｔｉｃａｌ　Ｓｃｉｅｃｅ，Ｎｏｒｎｔｈｗｅｓｔ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，２（５　ａｎ　７１００６９，Ｃｈｉｎａ）　Ａｂｓｔｒａｃｔ　Ｔｈｅ　ｐｏｓｔ—ｃｈｅｍｉｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｃｅ　ｂｅｈａｖｉｏｒ　ｏｆ　ｆｉｔｙ　ｔｈｒｅｅ　ｋｉｎｄｓ　ｏｆ　ｎｉｔｒｏｇｅｎｏｕｓ　ｏｒｇａｎｉｃ　ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ　ｗａｓ　ｆｓｔｕｄｉｅｄ　ｉｎ　ｔｈｅ　Ｎ—ｃｈｌｏｒｏｓｕｃｃｉｎｉｍｉｄｅ—ｄｉｃｈｌｏｒｏｆｌｕｏｒｅｓｃｅｉｎ　ｓｙｓｔｅｍ．Ｍａｎｙ　ｓｕｂｓｔａｎｃｅｓ　ｗｅｒｅ　ｆｏｕｎｄ　ｔｏ　ｈａｖｅ　ｔｈｅ　ｐｏｓｔ—　ｃｈｅｍｉｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｃｅ　ａｃｔｉｖｉｔｙ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｓｙｓｔｅｍ．Ａｆｔｅｒ　ｔｈｅ　ａｎａｌｙｓｉｓ　ｆｏｒ　ｔｈｅ　ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ　ｏｆ　ｔｈｅｓｅ　ｎｉｔｒｏｇｅｎｏｕｓ　ｏｒｇａｎｉｃ　ｃｏｍ—　ｐｏｕｎｄｓ，ｉｔ　ｗａｓ　ｆｏｕｎｄ　ｔｈａｔ　ｔｈｅ　ｓｔａｔｅ　ｏｆ　ｔｈｅ　Ｎ　ａｔｏｍ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｍｏｌｅｃｕｌｅｓ　ｗａｓ　ｉｍｐｏｒｔａｎｔ　ｔｏ　ｔｈｅ　ｐｏｓｔ・ｃｈｅｍｉｌｕｍｉｎｅｓ—　ｃｅｎｃｅ　ａｃｔｉｖｉｔｙ　ａｎｄ　ｔｈｅ　ｐｏｓｔ－ｃｈｅｍｉｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｃｅ　ｉｎｔｅｎｓｉｔｙ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｎｉｔｒｏｇｅｎｏｕｓ　ｏｒｇａｎｉｃ　ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ．Ｔｈｅ　ｐｏｓｓｉｂｌｅ　ｒｅａｃｔｉｏｎ　ｍｅｃｈａｎｉｓｍ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｐｏｓｔ・－ｃｈｅｍｉｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｃｅ　ｒｅａｃｔｉｏｎ　ｗａｓ　ｐｒｏｐｏｓｅｄ　ｂａｓｅｄ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｓｔｕｄｉｅｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｃｈｅｍｉｌｕ・・　ｍｉｎｅｓｃｅｎｃｅ　ｋｉｎｅｔｉｃ　ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ，ｔｈｅ　ｃｈｅｍｉｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｃｅ　ｓｐｅｃｔｒａ　ａｎｄ　ｔｈｅ　ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ　ｓｐｅｃｔｒａ　ｏｆ　ｓｏｍｅ　ｒｅｌａｔｅｄ　ｓｕｂｓｔａｎｃｅｓ．Ｔｈｅ　ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ　ｖａｌｕｅ　ｏｆ　ｔｈｅｓｅ　ｐｏｓｔ—ｃｈｅｍｉｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｃｅ　ｒｅａｃｔｉｏｎｓ　ｉｎ　ａｎａｌｙｔｉｃａｌ　ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ　ｗａｓ　ｅｓｔｉｍａｔｅｄ．　Ｋｅｙｗｏｒｄｓ　Ｐｏｓｔ—ｃｈｅｍｉｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｃｅ；Ｎ－Ｃｈｌｏｒｏｓｕｃｃｉｎｉｍｉｄｅ；Ｄｉｃｈｌｏｒｏｆｌｕｏｒｅｓｃｅｉｎ；　Ｎｉｔｒｏｇｅｎｏｕｓ　ｏｒｇａｎｉｃ　ｃｏｍｐｏｕｎｄ　（Ｅｄ．：Ｈ，Ｊ，Ｚ）