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2024年5月16日发(作者:)
北京雷根生物技术有限公司
叶绿素(Chlorophyll)检测试剂盒(微板法)
简介:
叶绿体是光合作用的细胞器,在光合作用研究中,常需要用提取的叶绿体展开下游研
究工作。叶绿体中所含的色素主要有两大类,叶绿素(包括叶绿素a和叶绿素b)和类胡萝卜
素(包括胡萝卜素和叶黄素),它们与类囊体膜上的蛋白质结合,成为色素蛋白复合体,其中
叶绿素又称叶绿体色素(Chlorophyll)。
Leagene叶绿素(Chlorophyll)检测试剂盒(微板法)检测原理是叶绿素不溶解于水,而
溶于有机溶剂,以有机溶剂粗提叶绿素,根据朗伯-比尔定律,某有色溶液的吸光度(
A
)与其
中溶质浓度(
C
)和液层厚度(
L
)成正比,即A=α
CL
,其中α为比例常数,当溶液浓度以百分比
浓度为单位,层液厚度为1cm时,α为该物质的吸光系数。在本试剂盒情况下,叶绿素a
和叶绿素b在有最大吸收波,根据经验公式可计算出叶绿素a、叶绿素b及总叶绿素含量。
该试剂盒主要用于植物组织中叶绿素的提取以及定量检测叶绿素a、叶绿素b及总叶绿素
含量。该试剂仅用于科研领域,不宜用于临床诊断或其他用途。
组成:
编号
名称
TP1051
100T
2
×
500ml
6g
Storage
试剂(A):ChlorophyllAssaybuffer
试剂(B):提取粉剂
使用说明书
RT
RT
1份
自备材料:
1、研钵或匀浆器
2、离心管
3、滤纸或纱布
4、96孔板
5、酶标仪
操作步骤
(仅供参考)
:
1、叶绿素提取:
①取菠菜或其他植物新鲜叶片,洗净,擦干,去中脉,称取剪碎的新鲜样品0.1g,置于研
钵或匀浆器,加入少量提取粉剂(约50mg)和1mlChlorophyllAssaybuffer,研磨或匀浆
成液态。
②将研磨液或匀浆液转移离心管,用少量叶绿素提取液冲洗研钵或匀浆器数次,最后连残
北京雷根生物技术有限公司
渣一同倒入离心管,补加ChlorophyllAssaybuffer,混匀,避光放置。
③观察底部组织残渣接近于白色,即为提取完全,如果仍有较多组织颜色,应再加入
ChlorophyllAssaybuffer继续避光放置。
④滤纸或三层纱布过滤,留取滤液,即为叶绿素粗提液。
2、测定:取叶绿素粗提液加入96孔板的孔中,以酶标仪,以ChlorophyllAssaybuffer
调零,测定粗提液在处吸光度(
A
665
、
A
649
)。
计算:
叶绿素a含量(mg/g)=C
a
×S×V×N/(W×1000)
叶绿素b含量(mg/g)=C
b
×S×V×N/(W×1000)
总叶绿素含量(mg/g)=C
T
×S×V×N/(W×1000)
式中:C
a
=13.95×
A
665
-6.88×
A
649
C
b
=24.95×
A
649
-7.32×
A
665
C
T
=6.63×
A
665
-18.07×
A
649
S=检测溶液的试剂高度(ml),可通过测量或计算获得。
V=叶绿素粗提液体积(ml)=10(ml)
N=稀释倍数
W=样品鲜重或干重(g)
注意事项:
1、为了避免叶绿素见光分解,操作时应尽量避光,研磨或匀浆时应尽量缩短时间。
2、测定吸光度值大于1时,可适当稀释后再行测定。
3、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期:
12个月有效。
相关:
编号
CS0201
DC0032
DM0007
TC1167
名称
细胞线粒体分离试剂盒
Masson三色染色液
瑞氏
-
姬姆萨复合染色液
尿素
(Urea)
检测试剂盒
(
脲酶波氏比色法
)
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