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2024年6月19日发(作者:)
CFX-荧光定量
(Bio-rad)
PCR仪操作指南
CFX96 实时荧光定量PCR仪操作流程及注意事项
开始运行仪器
打开电脑
打开定量PCR仪底座开关
启动CFX Manager软件
放置样品
将PCR反应体系加入到0.2ml低缘八联管,盖上管盖;或加入低缘96孔板,用光学级封膜封好。注
意,必须带一次性塑料手套,不要让手指接触到反应管表面。将反应管按顺序放入仪器的加热孔中。
设置程序,运行实验
定量PCR软件操作基本步骤为:a. 设置热循环程序文件(Protocol Tab) b.设置反应板文件
(Plate Tab)。 C.点击“Start Run”键,运行程序热循环程序文件(Protocol Tab)设置指南:点击
Edit(编辑)或 Create New(创建新程序)。
反应板设置文件(Plate Tab)设置指南:选择本次实验所要使用的荧光染料种类;单击样品类型;
如要某些反应孔第一荧光染料对应的样品类型为标准品(Standard),点击“Dilution Series”键可设
置其标准品浓度及稀释倍数。
点击“Start Run”键。单击open lid(打开热盖)或Close lid(关闭热盖)放置样品;单击Start
Run,保存文件,开始运行程序。
结果分析
PCR反应结束后,软件会自动计算标准曲线和Ct值等。
如需进行表达量分析、等位基因分析等, 在软件窗口选择相应分析功能。
点击右上方的“Report”键,还可输出结果报告单
关闭运行仪器
实验结束后取出反应管,顺序关闭CFX Manager软件、定量PCR仪电源,关闭电脑。注意!CFX仪器
上盖部分为全自动控制,在通电状态,严禁任何人为干涉上盖开启或关闭的行为,此类行为会导致上盖故
障,危及仪器使用。
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