Exendin-4对hIAPP诱导的胰岛β细胞凋亡的保护作用=刘辰,梁倩雯,赵济全

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2024年1月14日发(作者：)

578TianjinMedJ,June2022,Vol.50No.6细胞与分子生物学Exendin-4对hIAPP诱导的胰岛β细胞凋亡的保护作用刘辰，梁倩雯，赵济全摘要：目的用机制。方法探究Exendin-4对人源胰岛淀粉样多肽（hIAPP）诱导的胰岛β细胞凋亡的保护作用及其可能的作体外培养胰岛β细胞INS-1E，加入2.5、5、10、20µmol/L的hIAPP培养48h，建立hIAPP诱导细胞凋亡模型。20、50、100nmol/LExendin-4预处理24h，CCK-8法检测细胞活力，筛选有效的药物剂量。随后实验分为空白组、Exendin-4组、hIAPP模型组、hIAPP+Exendin-4组以及阳性对照组。LDH释放检测法分析膜通透性变化；化学发光法测定细胞内腺苷三磷酸（ATP）水平；JC-1荧光探针法检测线粒体膜电位的改变；Westernblot检测线粒体凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax以及Bad的表达。结果20µmol/L的hIAPP可以明显抑制INS-1E细胞增殖，增加LDH的释放，增加细胞内ATP的消耗，增加去极化线粒体膜电位比例，下调抗凋亡蛋白Bcl-2的表达，上调促凋亡蛋白Bax和Bad的表达（均P＜0.05）。与hIAPP组相比，hIAPP+Exendin-4组能够显著提高细胞活力，减少LDH释放，缓解ATP消耗，降低去极化线粒体膜电位的比例，上调Bcl-2并下调Bax和Bad的蛋白表达（均P＜0.05）。同时单独应用Exendin-4不会对细胞的生长产生影响。结论体凋亡途径相关。关键词：胰岛淀粉样多肽；胰岛素分泌细胞；细胞凋亡；Exendin-4；胰岛β细胞；线粒体凋亡中图分类号：R587.1文献标志码：ADOI：10.11958/20212648Exendin-4对由hIAPP诱导的胰岛β细胞凋亡具有保护作用，其机制与抑制线粒TheprotectiveeffectofExendin-4onhIAPP-inducedapoptosisofpancreaticβ-cellsDepartmentofDoctor-PatientRelations,theEighthAffiliatedHospital,SunYat-SenUniversity,Shenzhen518033,Chinainducedpancreaticβ-s基金项目：广东省自然科学基金项目（2017A030313766）作者单位：中山大学附属第八医院医务部医患关系科（邮编518033）作者简介：刘辰（1988），男，主管药师，主要从事抗糖尿病药物机制方面研究。E-mail：*****************LIUChen,LIANGQianwen,ZHAOJiquanAbstract:ObjectiveToexploretheprotectiveeffectofExendin-4onhumanisletamyloidpolypeptide(hIAPP)-INS-1Ecellswereculturedwith2.5,5,10,2is［J］.JClinInvest，2020，130（5）：：10.1172/［15］DIKICI，ismandmedicalimplicationsofmammalianautophagy［J］.NatRevMolCellBiol，2018，19（6）：［16］GATICAD，LAHIRIV，ecognitionanddegradationbyselectiveautophagy［J］.NatCellBiol，2018，20（3）：［17］HILLC，LIJ，LIUD，agyinhibition-mediatedepithelial-mesenchymaltransitionaugmentslocalmyofibroblast（8）：：10.1038/entiationinpulmonaryfibrosis［J］.CellDeathDis，2019，：10.1016/：10.1038/：10.1038/edproteinresponsepromoteprofibroticeffectsofTGF-β（1）2018，314（3）：：10.1152/nlungfibroblasts［J］.AmJPhysiolLungCellMolPhysiol，［20］KREMPASKAK，BARNOWSKIS，GAVINIJ，omycinhasenhancedeffectsonlungfibroblastsfromidiopathicpulmonaryRes，2020，21（1）：：10.1186/：10.3390/is（IPF）patientscomparedtocontrols［corrected］［J］.Respir［21］LawrenceJ，eofthemammaliantargetofrapamycin（mTOR）inpulmonaryfibrosis［J］.IntJMolSci，2018，19（3）：［22］MAY，QIM，ANY，agycontrolsmesenchymalstemcellpropertiesandsenescenceduringboneaging［J］.AgingCell，［23］PAVELM，RENNAM，PARKSJ，tinhibitioncontrolscellsurvivalandproliferationviaYAP/TAZ-autophagyaxis［J］.NatCommun，2018，9（1）：：10.1038/s41467-018-05388-x.（2021-11-25收稿2022-02-10修回）胡小宁）（本文编辑2018，17（1）：：10.1111/acel.12709.［18］LARSON-CASEYJL，DESHANEJS，RYANAJ，anceandpulmonaryfibrosis［J］.Immunity，2016，44（3）：582-［19］GHAVAMIS，YEGANEHB，ZEKIAA，agyandthe

天津医药2022年6月第50卷第6期579µmol/n-420,50and100nmol/-mentsweredividedpermeabilitywasdetectedbyLDHreleasedetectionkitandthegenerationofintracellularATPwasdetectedbyResultsintothecontrolgroup,theExendin-4group,thehIAPPgroupandthehIAPP+-1fluoresceneandintracellularATPconsumption,increasetheratioofdepolarizedmitochondrialmembranepotential,down-regulateBcl-2expression,andup-regulateBaxandBadprotein(P＜0.05).However,hIAPP+Exendin-4groupcansignificantlyimprovecellviability,reduceLDHrelease,increaseATPproduction,reducesionapoptosisofpancreaticβ-cells,n-4hasaprotectiveeffectonhIAPP-inducedapoptosismitochondrialmembranepotential,up-regulateBcl-2anddown-regulatetheexpressionofBaxandBadprotein(P＜0.05).Keywords:isletamyloidpolypeptide;insulin-secretingcells;apoptosis;Exendin-4;pancreaticβ-cells;mitochondrialComparedtothecontrolgroup,hIAPP(20µmol/L)cansignificantlyinhibitcellproliferation,increaseLDHWesternblotassaywasusedtodetecttheexpressionofmitochondrialapoptosis-relatedproteinsBcl-2,BaxandBad.2型糖尿病的主要特征为胰岛β细胞数量减少、胰岛素分泌减少以及胰岛淀粉样多肽（isletamyloidpolypeptide，IAPP）蛋白沉积［1-2］。人源胰岛淀粉样多肽（humanIAPP，hIAPP）是由胰岛β细胞合成的具有37个氨基酸残基的短肽，与胰岛素协同分泌［3］。hIAPP的过度沉积不仅影响胰岛素的正常分泌，而且能够促进胰岛β细胞的凋亡，从而导致2型糖尿病的发生［4］。研究表明，细胞膜功能紊乱、线粒体氧化应激参与了hIAPP诱导的胰岛β细胞凋亡过程［5］。Exendin-4是一种发现于希腊毒蜥毒液的短肠促胰岛素多肽，含有39个氨基酸残基，与胰高血糖素样肽-1（GLP-1）在结构上具有53%的同源性，属于GLP-1受体长效激动剂［6］。近年来研究发现，Exendin-4可以通过多种途径改善胰岛β细胞的功能，起到治疗糖尿病的作用［7-8］。本研究旨在探讨Exendin-4在体外对hIAPP诱导的胰岛β细胞凋亡的保护作用及其可能的分子机制。1材料与方法1.1材料小鼠胰岛β细胞INS-1E由本实验室保存；hIAPP购自南京肽谷生物科技有限公司；Exendin-4购自国Gibco公司；青霉素-链霉素购自美国HyClone公司；CCK-8（LDH）检测试剂盒、腺苷三磷酸（ATP）检测试剂盒、JC-1线粒体膜电位检测试剂盒购自北京碧云天公司；鼠源Bcl-2、PVDF膜、ECL发光液购自美国Millipore公司。细胞培养箱Bax、Bad、Tubulin一抗及二抗购自武汉Proteintech公司；购自青岛海尔公司；电泳、转膜装置购自美国Bio-Rad公司，多功能酶标仪购自英国PerkinElmer公司，全自动化学发光成像分析系统购自上海天能公司；流式细胞仪购自美国BD公司。MedChemExpress公司；胎牛血清、RPMI1640培养基购自美细胞增殖毒性检测试剂盒、BCA定量试剂盒、乳酸脱氢酶1.21.2.1方法细胞培养及药物配制将INS-1E细胞置于含10%胎牛血清、100U/mL青霉素、100mg/L链霉素的RPMI1640培养基中，37℃、5%CO2饱和湿度培养箱中培养至对数生长期。称量hIAPP和Exendin-4粉末，加适量超纯水，配制成1mol/L成实验所需浓度的工作液，冷藏保存。1.2.2CCK-8法分析hIAPP诱导细胞凋亡以及Exendin-4的取对数生长期的INS-1E细胞，按照4×103个/孔接保护作用母液，分装保存。实验前，取一定量母液用细胞培养液稀释种于96孔板，培养过夜后弃掉培养基，加入含有2.5、5、10、20µmol/LhIAPP的完全培养基培养48h，建立hIAPP诱导INS-1E细胞凋亡模型。之后用20、50、100nmol/L的Exendin-4预处理细胞24h筛选Exendin-4的有效浓度，每孔加入10µL的CCK-8试剂，继续培养2h。用酶标仪在450nm处测定各组光密度（OD）值。实验重复3次，取3孔平均值。按照公式计算细胞增殖率，细胞增殖率=［（对照组平均OD值-实验组平均OD值）/空白组平均OD值］×100%。1.2.3细胞LDH释放检测将对数生长期细胞接种于96孔板，分为空白组、Exendin-4组、hIAPP模型组、hIAPP+Exendin-4组以及阳性对照组（LDH释放试剂）。Exendin-4预处理24h后加入hIAPP处理48h。将细胞培养板用多孔板离心机300×g离心5min。分别取各孔的上清液120µL，加入到新的96孔板中，每孔加入60µL的LDH检测工作液，在490nm处测定OD值。实验重复3次，取3孔平均值。1.2.4细胞内ATP检测细胞接种于6孔板，实验分为空白组、Exendin-4组、hIAPP模型组、hIAPP+Exendin-4组。用预冷PBS清洗，加入200µL裂解液，裂解细胞。裂解后Exendin-4预处理24h后加入hIAPP处理48h。去除培养液，4℃、12000×g离心5min，取适量上清液加入到新的检测板进行检测。实验重复3次，取3孔平均值。根据ATP标准品绘制标准曲线，计算ATP的浓度。1.2.5JC-1荧光探针法检测线粒体膜电位细胞分组处理内，随后立即加入ATP检测工作液，震荡混匀，用化学发光仪

580同1.2.4，处理48h后，消化细胞并重悬于1mL细胞培养液中，加入1mLJC-1染色工作液，颠倒混匀，细胞培养箱中孵育JC-120min。孵育结束后，500×g、4℃离心3min收集细胞。用JC-1染色缓冲液洗涤2次，沉淀细胞，弃上清液，色荧光的比例分析线粒体膜电位的变化。实验重复染色缓冲液重悬细胞，流式细胞仪上机检测。根据红绿再用适量的3次。1.2.6Westernblot检测相关蛋白表达分组同1.2.4，各组相应处理48h后，用RIPA裂解液裂解细胞，BCA蛋白定量试剂盒进行蛋白定量，SDS-PAGE加入5×上样缓冲液后煮沸5温封闭Bad1h，分别加入一抗抗体电泳进行蛋白分离，Bcl-2半干法电转运至（1∶1000）、BaxPVDFmin。应用（膜，室后，（二抗室温孵育1∶2000），Tubulin1h（，加入1∶10ECL000）发光液，，4℃孵育过夜。1∶1000）、使用天能成像系统TBST洗涤检测发光情况。用ImageJ软件对目的蛋白条带进行灰度值分析，计算相对表达量。1.3统计学方法采用软件GraphPad7.0进行数据分析。符合正态分布的计量资料用均数±标准差（x±s）表示，多组间均数比较用单因素方差分析，组间多重比较采用Tukey’s检验，P＜0.05为差异有统计学意义。2结果2.1Exendin-4抑制hIAPP诱导的INS-1E细胞凋亡1E和67%细胞终浓度为5、10、20µmol/L的hIAPP作用于INS-（48P＜h0.05后，）细胞的增殖率分别下降了，见图1。选择20µmol/L23%作为凋亡、50%诱导的实验浓度。终浓度为Exendin-420和100nmol/L预处理的Exendin-424h后加入、50和100nmol/L的可有效缓解由hIAPP，结果显示，hIAPP50导致的细胞凋亡（P＜0.01），见图2，后续采用50nmol/L的Exendin-4为实验浓度。0.80.6054DO0.4ab0.2abcabcd0.0F=136.200，P＜0.010；a与2.50µmol/L5比较，10b与20（µmol/L）µmol/LFig.1组比较，Effectsd与of10differentµmol/Lconcentrations组比较，P＜0.05ofhIAPP。2.5µmol/L比较，c与5INS-1Ecellsonapoptosisof图1不同浓度hIAPP对INS-1E细胞凋亡的影响2.2LDHExendin-4抑制hIAPP细胞释放诱导的INS-1E细胞内LDH的释放与空白组比较，（P＜0.05），hIAPP而Exendin-4模型组显著增加预处理后能Exendin-4够明显组对降低LDH细胞释放无影响，外LDH的见图水平3（。P＜0.05），TianjinMedJ,June2022,Vol.50No.60.80.6bb054DaO0.40.2Exendin-4hIAPP（（µmol/L0.0nmol/L））--20-20F=143.400，P＜0.01；a与空白组比较，202050b与1002020µmol/LhIAPP组比较，P＜0.05。Fig.2TheeffectsofExendin-4图2不同浓度Exendin-4对INS-1EonhIAPPcellshIAPPinducedapoptosisof诱导的INS-1E细胞凋亡的影响0.8b0.6a094DbO0.40.20.0A：空白组；B：Exendin-4A组；BC：hIAPPC模型组；DE组；E：阳性对照组；F=49.000，P＜0.01；a与空白组比较，D：hIAPP+Exendin-4b与hIAPP模型组比较，P＜0.05。Fig.3Changes图3of各组LDHINS-1Erelease细胞levelLDHofINS-1E释放水平变化cellsineachgroup2.3ATP细胞内消耗Exendin-4ATP与空白组比较，减少hIAPP的消耗（P＜0.01hIAPP导致的INS-1E细胞内），而Exendin-4模型组明显增加预处理后能够缓解由Exendin-4hIAPP导致的细胞内ATP的消耗，1.5组对ATP的生成无影响，见图4。l）l1.0bec/lomP（fTA0.5a0.0A：空白组；B：Exendin-4ABCD组；F=202.400，P＜0.01；a与空白组比较，组；C：hIAPP模型组；b与hIAPPD：hIAPP+Exendin-4模型组比较，PFig.＜0.054。Comparison图4各组oftheINS-1EATPconsumption细胞内ATPin消耗情况比较INS-1Ecellsineachgroup2.4Exendin-4阻止hIAPP诱导的INS-1E细胞线粒体膜电位丢失结果显示，hIAPP处理后，去极化线粒体的比例明显高于空白组，hIAPP导致了线粒体膜电位的丢失，而Exendin-4预处理后能够显著降低去极化线粒体的比例，抵抗细胞凋亡，Exendin-4组对线粒体膜电位无明显影响，见图5、表1。

天津医药2022年6月第50卷第6期103102101Exendin-4组100空白组hIAPP模型组1PI-AhIAPP+Exendin-4组PI-API-A10FITC-A210Fig.54100PI-AComparisonofmitochondrialmembranepotentiallossbetweenfourgroupsofINS-1Ecells图5各组INS-1E细胞线粒体膜电位丢失情况比较10FITC-A21FITC-A21FITC-A104Tab.1ComparisonofapoptosisrelatedproteinexpressionlevelsbetweenthefourgroupsofINS-1Ecells表1各组INS-1E细胞凋亡相关蛋白表达水平变化比较（n=3，x±s）组别空白组Exendin-4组hIAPP模型组F去极化线粒体比例（%）Bcl-2BaxBadhIAPP+Exendin-4组23.20±4.43b0.83±0.11b1.51±0.13b1.35±0.18b＊＊abP＜0.01；与空白组比较，与hIAPP模型组比较，P＜0.05。41.30±8.06a0.39±0.08a2.09±0.26a1.96±0.26a28.570＊＊136.400＊＊91.880＊＊66.580＊＊12.20±1.101.16±0.210.93±0.041.05±0.199.86±0.771.00±0.051.00±0.211.00±0.112.5Exendin-4调控线粒体凋亡途径相关蛋白的表达与空白组相比，hIAPP模型组抗凋亡蛋白Bcl-2表达水平下降，促凋亡蛋白Bax和Bad的表达水平升高，Exendin-4预处理后能显著上调Bcl-2的表达，同时下调Bax和Bad的表达，见表1、图6。Bcl-2BaxBadTubulinABCDExendin-4组。Fig.6A：空白组；B：Exendin-4组；C：hIAPP模型组；D：hIAPP+Theapoptosis-relatedproteinexpressionlevelsof各组INS-1E细胞凋亡相关蛋白表达水平INS-1Ecellsineachgroup图63讨论胰岛素在糖尿病的治疗过程中起着至关重要的作用。胰岛β细胞是内源性胰岛素产生的唯一来源，其功能正常是维持体内血糖和代谢平衡的重要因素。研究发现约40%的2型糖尿病患者胰岛中有大量的淀粉样蛋白沉积［9］，经鉴定其主要成分是IAPP［10］。目前IAPP被认为是聚集性较强的多肽之一，当血糖升高时，IAPP浓度成倍增加，由于hIAPP是由胰岛β细胞分泌，其在胰岛周围的浓度要显著高于血液中的浓度［11］。研究发现，胰岛周围高浓度的hIAPP通过形成大量淀粉样沉积进而导致胰岛β细胞的凋亡以及功能紊乱［12］。对于由hIAPP沉积引起的细胞凋亡的具体机制尚不明确。目前研究认为其可能通过激活c-Jun氨基末端激酶（JNK）和丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）信号通路，诱导细胞凋亡［13-14］。本研究结果显示，随着hIAPP浓度的增加，INS-1E细胞增殖活性明显降低，表明hIAPP的聚集可以抑制INS-1E细胞增殖。LDH是存在于细胞中的一种稳定酶，当质膜损伤后迅速释放到细胞培养基中，是反映细胞毒性的标志物。本研究发现hIAPP可以加速INS-1E细胞中LDH的释放，促进细胞凋亡。研究表明，胰腺中GLP-1及其类似物Exendin-4能够促进胰岛β细胞增殖，抑制β细胞凋亡，刺激胰岛素的合成以及分泌；而在肝脏、肌肉及脂肪组织中，GLP-1则能够促进葡萄糖的吸收，并增加肝脏的胰岛敏感性；此外，GLP-1还通过抑制胃排空来增加饱腹感［7］。但是对于Exendin-4能否改善由IAPP聚集引起的β细胞凋亡及其机制还缺乏研究。本研究发现，Exendin-4可以促进胰岛β细胞的增殖并且明显减少由IAPP导致的细胞内LDH释放，提示Exendin-4具有改善IAPP诱导的细胞凋亡的作用。根据激活方式和信号分子通路的不同，细胞凋亡可分为外源性途径的细胞凋亡和内源性途径的细［15］胞凋亡（也称为线粒体途径的细胞凋亡）。内源性途径的细胞凋亡是糖尿病胰岛β细胞死亡的一种主要方式［16］。线粒体膜电位丢失是内源性细胞凋亡的重要特征，会影响线粒体ATP的产生以及诱导促凋亡因子的释放［17］。在本研究中，INS-1E细胞接触hIAPP后会损伤线粒体功能，抑制ATP的产生，并导致线粒体膜电位严重丢失，去极化比例增加。而Exendin-4可以有效增加ATP的含量，并且恢复线粒体膜电位至正常水平。

582些家族蛋白彼此间相互作用维持平衡来共同调控线Bcl-2蛋白家族由抗凋亡和促凋亡成员构成，这粒体功能，在线粒体途径的凋亡发生过程中具有关键作用［18－19］。促凋亡蛋白Bax和Bad能通过增加线粒体膜的通透性加速细胞凋亡。而抗凋亡蛋白成员Bcl-2和促凋亡蛋白表达水平的平衡是维持线粒体膜电位可以维持线粒体外膜的完整性。抗凋亡蛋白的重要因素［20］。已有研究结果显示，Exendin-4可以通过调节ERK1/2通路保护棕榈酸酯毒性诱导的细胞hIAPP凋亡［21］。本实验中，Exendin-4能够明显抑白表达上调。导致的Bcl-2蛋白表达下调以及Bax和Bad制蛋综上所述，Exendin-4可以通过线粒体途径改善由hIAPP聚集导致的胰岛β细胞凋亡，其作用机制可能与Exendin-4调控线粒体膜电位和凋亡相关蛋白表达有关。本研究为Exendin-4的临床应用提供了新的理论依据。参考文献1］sisandclassificationofdiabetesdoi：10.2337/us［J］.DiabetesCare，2013，36（Suppl1）：S67-74.2］CHANJCN，LIMLL，WAREHAMNJ，cetCommissionpatientlives［onJ］：，using2021data，396to（transform10267）：iand10.1016/s0140-6736(20)32374-6.：3］MATHIESENDS，LUNDA，VILSBØLLT，andcalcitoninandliver：fatPotential［J］.FronttherapeuticEndocrinolstrategies（Lausanneto）reduce，2020，body11：4］doiXU：10.3389/fendo.2020.617400.J，WIJESEKARAN，REGEENESR，aticβcell-selectiveassociatedzincwithtransporterisletamyloidosis8insufficiency［J］.JCIInsightaccelerates，2021，：10.1172/t.143037.（10）：5］WONGHY，HUIQ，HAOZ，eofmitochondrialapoptoticpathwayEndocrinolin，2021islet，537amyloid-induced：：10.1016/.2021.111424.β-celldeath［J］.MolCell6］-1receptoragonistsforindividualizedtreatmentoftype728-742.2diabetesdoi：10.1038/us［J］.NatRevEndocrinol，2012，8（12）：7］YAPM，n-4fromHelodermasuspectumvenomcombatant：From［J］lintoitsPharmacollatestapplicationToxicol，2019astype，124Ⅱ（5）oi：10.1111/bcpt.13169.：513-8］SE，-1peptideanalogs2021，26（for8）targeting：aticdoi：10.1016/lls［J］.DrugDiscovToday，TianjinMedJ,June2022,Vol.50No.6［9］ZHAOHL，LAIFM，TONGPC，enceandclinicopat：10.2337/2diabetes［J］.Diabetes，2003，52（11）：2759-［10］MIYAZATOM，NAKAZATOM，SHIOMIK，iochemamyloidBiophyspolypeptideResCommuninmammalian（1）：ct：10.1016/s0006-291x［J］(05)81416-0.，1991，181［11］BISHOYIAK，ROHAMPH，RACHINENIK，sletamyloidmellitus：insightspolypeptidefrom（structurehIAPP）and-atoxicitycursestudiesintype［J］.ⅡBioldiabetes2021，402（2）：：10.1515/，［12］LIUX，LIQ，CHENGX，annuronatepreventsmitochondrialbyinhibitionofdysfunctioninducedbyIAPPinRINm5Fisletcells］2020GUJ，，15WEI：，ZHENG：JNK10.1186/tionandcellapoptosis［J］.ChinMed，［13H，n-4promotessurvivalofmouseextracellularpancreaticβ-celllineinlipotoxicpathwayconditions［J］.JDiabetes，throughResthe2016，2016：-relateddoi：10.1155/2016/1/2，［14］JIANGD，n-4protectsINS-1cellsagainstpalmitate-inducedpathway［J］.ExpapoptosisTherMedthrough，2018，the16（IRE1α2）：1029-1035.-Xbp1signaling10.3892/：［15］BOCKFJ，ondriaasmultifacetedregulatorsofcelldeath10.1038/s41580-019-0173-8.［J］.NatRevMolCellBiol，2020，21（2）：：［16］COSTESS，BERTRANDG，ismsofbeta-cellprotectionapoptosisbyGLP-1-basedintype2diabetes-pronetherapies［J］.situationsIntJMolandSci，2021potential（10）：：10.3390/ijms22105303.，22［17］TOMITAK，KUWAHARAY，IGARASHIK，ondrialdysfunctionmitochondriainfunctiondiseasesas，longevityatherapeutic，andstrategytreatment［J］（：BaselTuning2021，12（9）：：10.3390/genes12091348.），［18］KALEJ，OSTERLUNDEJ，-2familyproteinsDeathDiffer：changing，2018，partners25（1）：oidance：10.1038/sdeath［J］.Cell［19］GLABJA，CAOZ，-2familyproteins，beyond10.1016/l［J］.IntRevCellMolBiol，2020，351：：［20］MEANSRE，inglifeanddeath：rsedoi：10.1111/-mitochondrial［contactsites［J］.FEBSJ，［21］MADHUD，KHADIRA，HAMMADMEpub，heofGLP-1print］.analogexendin-4mousepancreaticmodulatesHSP72BiochimexpressionBiophysandERK1/2ActaProteinsactivityProteominBTC62020，1868（7）：［J］.，（doi2021-11-26：10.1016/.2020.140426.收稿2022-02-28修回）（本文编辑胡小宁）［［［［［［［［

本文标签： 细胞凋亡线粒体胰岛蛋白