兔瘙痒模型的建立

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2024年7月18日发(作者：)

贵州畜牧兽医　２０１３年　第３７卷　第５期　・９・　

兔瘙痒模型的建立　

娄焕军，徐在品　

（贵州大学动物科学学院，贵州贵阳５５００２５）　

摘要：试验选择体重３．２３±０．６３　ｋｇ奇卡兔２０只，单独或联合应用组胺和４一氨基吡啶（４一ＡＰ）建立兔瘙痒模型。将兔　

随机分为４组，皮下注射造模药物后记录搔抓反应次数和搔抓潜伏期，检测注射药物前后小鼠血清中的组胺、ＩＦＮ一　和ＩＬ一６　

的浓度。结果显示：组胺和４一ＡＰ联合运用后搔抓潜伏期显著缩短，４０　ｍｉｎ内搔抓次数均极显著增加（Ｐ＜０．０１）。组胺致瘙　

痒模型组的兔血清组胺浓度升高，与其他３组相比差异极显著（Ｐ＜Ｏ．０１）；其他２个细胞因子的浓度在各组之间差异均未达　

到统计学显著水平。联合应用组胺和４一ＡＰ建立的瘙痒模型效果优于组胺和４一ＡＰ单独作用。　

关键词：马来酸氯苯那敏；组胺；ＩＦＮ一．ｙ；ＩＬ一６　

中图分类号：￥８５８．９１　文献标识码：Ａ　文章编号：１００７—１４７４（２０１３）０５—０００９—０３　

瘙痒是皮肤科最常见的症状之一，是许多慢　

１．２试验方法试验前１天用脱毛剂脱去兔头右　

性皮肤病共同的主要症状。目前，对于瘙痒的分　

子和细胞机制尚未完全清楚，临床上也缺乏有效　

的治疗措施。为进一步探索瘙痒症状的细胞机制，　

侧颈部耳后部分皮肤的被毛备用。将奇卡兔随机分　

为４组，在脱毛部位皮下注射造模药物，给药方案见　

表１。后立即置瘙痒观察网中观察４０　ｍｉｎ，并用数　

本研究用组胺和４一ＡＰ（４一氨基吡啶）联合应用　

建立兔瘙痒模型，对其搔抓行为学进行观察，运　

用血清ＥＬＩＳＡ方法检测其对几种与瘙痒相关的细　

码摄像机记录。以兔后肢持续搔抓注射部位至停止　

记作１次搔抓（连续搔抓记作１次）。观察搔抓潜　

伏期（注射结束至第１次搔抓开始的时问）和　

４０　ｍｉｎ内搔抓总次数。　

记录结束后每只立即取血２　ｍＬ，静置至血液分　

层后离心取血清一２０　ｃｃ保存。将一２０　ｃＣ保存的血　

胞因子的影响，并与对照组和单因素致瘙痒组进　

行比较。　

１材料与方法　

１．１试验动物奇卡兔２０只，体重２．２～３．８　ｋｇ，　

清常温下融解，选取血清较多且溶血程度较轻的样　

本，按照ＥＬＩＳＡ试剂盒要求操作检测兔血清中组　

胺、ＩＦＮ一　和ＩＬ一６的浓度，并进行统计学分析。　雌雄兼用，由贵阳花溪罗发兔养殖有限公司提供。　

表１　兔复合瘙痒模型建立方法研究分组及各组造模药物方案　

１．３试验试剂　（１）马来酸氯苯那敏，ＳＩＧＭＡ公　

司。（２）磷酸组胺和４一ＡＰ，北京博远泰隆生物技　

术有限公司。（３）兔血清组胺ＥＬＩＳＡ检测试剂盒，　

收稿日期：２０１３一Ｏ５—２８　

北京鸿跃创新生物科技有限公司。　

１．４　数据处理方法　结果用互±ｓ表示，采用　

ＳＰＳＳ１７．０软件进行描述统计分析和方差分析。　

２结果与分析　

２．１行为学试验结果　采用单因素和复合因素致　

作者简介：娄焕军（１９７４一），男，在读硕士。　

通讯作者：徐在品（１９７Ｏ一），男，博士，教授，研究方向为临床兽医。　

・

１０・　贵州畜牧兽医　２０１３年　第３７卷　第５期　

瘙痒模型分别进行试验，其行为学结果见表２。　

数据经方差分析，结果显示：与空白对照组相比，　

组胺致瘙痒模型组、４一ＡＰ致瘙痒模型组与复合　

痒模型组之问差异不显著。复合因素致瘙痒模　

型组的４０　ｍｉｎ内搔抓次数分别比组胺致瘙痒模　

型组以及４一ＡＰ致瘙痒模型组高２８６．２７％和　

因素致瘙痒模型组的４０　ｍｉｎ内搔抓次数分别增　

加了８８．８９％、２８１．４８％和６２９．６２％，４一ＡＰ致　

９１．２６％，复合因素致瘙痒模型组与前３组的差　

异极显著（Ｐ＜０．０１）；复合因素致瘙痒模型组的　

搔抓潜伏期与空白对照组和单因素致瘙痒模型　

差异都极显著（Ｐ＜０．０１）。　

瘙痒模型组与空白对照组和组胺致瘙痒模型组　

的差异显著（Ｐ＜０．０５），空白对照组和组胺致瘙　

表２不同建立方法对瘙痒模型兔搔抓行为学的影响（面±ｓ）　

２．２血清检测结果按照血清ＥＬＩＳＡ检测试剂盒说　胺致瘙痒模型组的兔血清组胺浓度升高１０５．５３％，差　

异极显著（Ｐ＜０．０１）；其他２个细胞因子的浓度在各　

组之问差异均未达到统计学显著水平。　

明书要求分别检测兔血清中３种细胞因子（组胺、ＩＦＮ　

一　

ＩＬ一６）的浓度结果见表３。与其他３组相比，组　

表３不同建立方法对瘙痒模型兔血清细胞因子浓度的影响（互±ｓ）　

３　讨论　

３．１　目前和瘙痒有关的病理生理学机制还不完全　

产生舔体反应　。本研究的结果显示，实验小鼠在　

３０　ｍｉｎ内搔抓次数增多，搔抓潜伏期缩短，血清　

ＥＬＩＳＡ的结果也显示复合因素致瘙痒模型组的小鼠　

血清组胺、ＩＦＮ一　、ＩＬ一６的浓度与对照组相比均　

有显著变化。　

清楚，在基础研究的过程中，瘙痒动物模型成为探　

讨、评价瘙痒治疗方法的有效手段。用来建立瘙痒　

动物模型的实验动物较多，最常用的是小鼠　叫］，其　

３．３瘙痒大都由较为复杂的因素引起，但临床上　

的瘙痒模型的建立大多采用单因素致瘙痒的方法，　

次是大鼠　，也有利用较高等的实验动物（如　

猴）［６ｊ。兔是兽医研究中常用的实验动物，也有人　

利用兔建立瘙痒模型【　，本研究也选择兔作为实验　

动物，但建立模型的介导物质与以往对兔的瘙痒模　

型的研究方法不同。　

本研究参考王晖等利用复合物质建立小鼠瘙痒模型　

的方法　Ｊ，采用组胺和４一ＡＰ联用建立了兔的瘙　

痒模型，与对照以及单一因素致瘙痒模型相比，所　

致动物搔抓反应频率更高，潜伏期更短，表明该模型　

是一种较好的瘙痒动物模型。本研究建立的兔模型　

可为其他实验动物的研究提供参考数据，为瘙痒的　

生理和病理研究提供必要的基础资料。　

参考文献：　

３．２组胺是最早发现的瘙痒介导物质之一，在各类　

荨麻疹、昆虫咬伤反应、表皮肥大细胞增生或药物性　

皮炎所引起的瘙痒发生过程中起介导作用　］。　

４一ＡＰ具有促肥大细胞释放组胺的作用。吴娜等实　

验证实，在小鼠颈背部皮下注射４一ＡＰ可诱导小鼠　

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ｂｉｎｅｌｙ　ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｅｄ　ｔｏ　ｅｓｔａｂｌｉｓｈ　ｒｂｂｉａｔ　ｉｔｃｈｉｎｇ　ｍｏｄｅ１．Ｒａｂｂｉｔｓ　ｗｅｒｅ　ｒａｎｄｏｍｌｙ　ｄｉｖｉｄｅｄ　ｔｏ　４　ｇｒｏｕｐｓ．Ｓｃｒａｔｃｈｉｎｇ　ｉｎｃｕｂａｔｉｏｎ　ｐｅｒｉｏｄ（ＩＣＰ），ｓｃｒａｔｃｈｉｎｇ　ｎｕｍ－　

ｂｅｒｓ　ｗｉｔｈｉｎ　４０　ｍｉｎｕｔｅｓ　ｗｅｒｅ　ｒｅｃｏｒｄｅｄ　ａｆｔｅｒ　ｈｙｐｏｄｅｒｍｉｃ　ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ　ｗｉｔｈ　ｄｒｕｇ　ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ．Ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｈｉｓｔａｍｉｎｅ，ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ一．ｙ（ＩＦＮ一　）ａｎｄ　ｉｎｔｅｒ－　

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０．Ｏ１）．Ｔｈｅ　ｓｅｒｕｍ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ　ｏｆ　ｈｉｓｔａｍｉｎｅ　ｄｅｃｒｅａｓｅｄ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｈｉｓｔａｍｉｎｅ　ｇｒｏｕｐ．Ｉｔ　ｗａｓ　ｓｉｎｉｇｉｆｃａｎｔｌｙ　ｈｉｇｈｅｒ　ｔｈａｎ　ｔｈｅ　ｏｔｈｅｒ　ｔｈｒｅｅ　ｇｒｏｕｐｓ（Ｐ＜０．０１）．Ｔｈｅ　

ｓｅｒｕｍ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ　ｏｆ　ＩＦＮ一　ａｎｄ　ＩＬ一６　ｈａｄ　ｎｏ　ｓｉｇｎｉｉｆｃａｎｔ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ　ａｍｏｎｇ　ｔｈｅｓｅ　ｆｏｕｒ　ｇｒｏｕｐｓ（Ｐ＞０．０５）．Ｐｒｕｒｉｔｕｓ　ｍｏｄｅｌ　ｃｏｕｌｄ　ｂｅ　ｅｓｔｂｌａｉｓｈｅｄ　ｂｙ　ｃｏｍ—　

ｂｉｎａｔｉｏｎ　ｕｅｓ　ｏｆ　ｈｉｓｔａｍｉｎｅ　ａｎｄ　４一ＡＰ．　

Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：Ｃｈｌｏｒｐｈｅｎｉｒａｍｉｎｅ　Ｍａｌｅａｔｅ；Ｈｉｓｔａｍｉｎｅ；ＩＦＮ一　；ＩＬ一６　

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