ABO_正反定型不符的白血病患者血型鉴定与临床分析

,

检验医学与临床

2024

年

3

月第

21

卷第

5

期

LabMedClinMarch2024

,

Vol.21

,

No.5

·

临床研究

·

:/

.1672-9455.2024.05.025

j

·

695

·

*

正反定型不符的白血病患者血型鉴定与临床分析

ABO

李

茜

,

张智慧

,

高力立

,

彭沫溱

,

陈

璐

,

赵梓昕

,

寸

伟

,

罗

臻

△

,

苏品璨

云南昆明血液中心输血研究室

,

云南昆明

650106

采用亚硫酸氢盐测序检测

AABO

血型基因分型

;

BO

启动子甲基化状态

。

结果

患者

ABO

血型正定型结果为

反定型结果为

A

型

,

正反定型结果不一致

;

试管法重复试验

,

吸收放散试验结果显

O

型

,

4℃

时可见

A1c

凝集

;

目的

对

1

例白血病患者

A

旨在为同类患者血型

摘

要

:

BO

血型鉴定异常结果进行鉴定与回顾性分析

,

相容性检测提供参考

。

方法

采用血清学检测进行

A

采用聚合酶链反应序列特异性引物进行

BO

血型鉴定

,

-

示红细胞表面存在

A

抗原

,

提示正定型结果为

A

型

;

不规则抗体筛查阴性

,

直接抗人球蛋白试验阴性

;

基因分

型检测基因型为

AO

表型为

A

型

;

甲基化检测发现患者

A

明显高于随

1

,

BO

基因启动子区甲基化率为

66.7%

,

机选取的

5

例正常对照组标本平均甲基化率

。

结论

白血病患者

A

疾病状态

BO

抗原减弱可能导致血型误判

,

下患者

A

须结合分子生物学基因分型和血

BO

基因启动子甲基化程度增高可能与其

ABO

抗原减弱密切相关

,

型基因甲基化检测方法进一步判断患者血型鉴定异常的原因

,

保障临床用血安全

。

;

中图法分类号

:

R733.7R457.1+1

文献标志码

:

A

关键词

:

白血病

;

序列特异性引物

;

ABO

血型鉴定

;

血清学检测

;

聚合酶链反应

-

甲基化

既

输血作为一种临床救治患者的常用治疗手段

,

可提高患者携氧功能

,

又能改善其凝血功能障碍

,

因

此

,

输血前的

ABO

血型鉴定对保障临床输血安全尤

为重要

。

A

一般

BO

血型是由

ABO

基因编码决定的

,

情况下人体

ABO

血型不会发生改变

。

白血病是起源

1-2

]

,

于造血干细胞或祖细胞的恶性克隆性疾病

[

白血

()

文章编号

:

1672-9455202405-0695-05

患者严重贫血

,

急需输血

,

因其

ABO

血型鉴定正

/

反

定型不一致

(

正定型结果为

O

型

,

反定型结果为

A

,

型

)

医院将患者血液标本送检至血液中心进行

ABO

血型鉴定和疑难交叉配血实验

。

病患者处于疾病状态可能引起自身体内血细胞或血

浆成分发生改变

,

导致

ABO

抗原减弱或

ABO

抗体效

]

3-4

。

多

极易引起血型误判

,

直接关系临床输血安全

[

1.2

仪器

ABO

血型定型检测卡配套孵育器和离

,

心机

(

长春博迅生物技术有限责任公司

)

KA2200

型

,

血型血清学专用离心机

(

日本久保田公司

)

电热恒温

,

水浴箱

(

上海博迅实业有限公司

)

冰箱

(

海尔集团海

,

尔电冰箱有限公司

)

MaCoreHF16

自动核酸提取

g

价降低

,

出现

ABO

血型鉴定正反定型不相符的情况

,

种因素均可导致患者

A

近年来

,

有研究

BO

抗原减弱

,

发现

,

ABO

基因启动子区甲基化程度与

ABO

抗原表

]

5-8

,

达异常有关

[

但相关文献报道较少见

。

本研究通

,

仪

(

中国台湾

RBCBioscience

公司

)

T100PCR

反应

检测和

ASSP

)

BO

基因启动子区甲基化状态检测等

检测手段对

1

例白血病患者的

ABO

血型鉴定检测异

常结果

、

原因及处理方法进行了分析

,

初步探讨了白

血病中

ABO

基因甲基化状态异常导致

ABO

抗原表

达减弱在输血相容性检测中的临床意义

,

以期为临床

诊疗提供参考依据

,

现报道如下

。

过血清学

、

聚合酶链反应序列特异性引物

(

-PCR-

,,

ratories

公司

)

3730

测序列分析仪

(

美国

ABI

公司

)

,

江苏苏洁净化设备厂

)

SW-CJ-1D

洁净工作台

(

DK-

,

美国

BTM

基础电泳仪

(

io-RadLaboratories

公司

)

美国

BChemiDocXRS+

凝胶成像系统

(

io-RadLabo-

,

扩增仪

(

美国

Bio-RadLaboratories

公司

)

PowerPac

,

上海森信实验仪器有限公司

)

8D

型电热恒温水槽

(

上海琪特分析仪器有限公

DYY-8

型稳压稳流电泳仪

(

,,

司

)

湘仪离心机仪器有限公司

)

YXJ-2

离心机

(

H6-1

,

微型电泳槽

(

上海精益有机玻璃制品仪器厂

)

U-3010

1

资料与方法

1.1

一般资料

血液标本来源于云南省肿瘤医院

,

患者

,

女

,

患恶性血液病

,

有

2

次输血史

,

患者知

24

岁

,

月

3

日初次诊断为白血病

,

目前患者白细胞计数

,

紫外可见分光光度计

(

移液器

(

范围

-Hitachi

公司

)

德国艾本德

100~1000

μ

L

,

20~200

μ

L

,

0.5~10

μ

L

,

。

EPPENDORF

公司

)

抗

单克隆抗体

1.3

试剂

抗

-A

、

-B

血型定型试剂

-

微柱凝胶

ABO

血型卡正

/

反定型和

RhD

血型检测卡

-

/

法

(

批

DiaMedGmbHBio-Rad

低离子抗人球蛋白卡

,

情同意本研究并签署知情同意书

。

患者于

2022

年

2

9

(/

为

2

血红蛋白

(

为

5

血

WBC

)

06×10

/

L

,

Hb

)

1

g

L

,

9

小板计数

(

为

3

同时伴有脾脏肿大

。

PLT

)

8×10

/

L

,

(,

上海血液生物医药有限责任公司

,

批号

20220101

)

,

号

5

抗

上海血液生物医药

0093.11.28

)

-A1

凝集素

(

*

△

:

通信作者

,

E-mailkmbloodlz@

g

。

)。

基金项目

:

云南省临床医学中心分中心开放项目

(

2020LCZXKF-XY19

·

696

·

,

检验医学与临床

2024

年

3

月第

21

卷第

5

期

LabMedClinMarch2024

,

Vol.21

,

No.5

有限责任公司

,

批号

海血液生物医药有限

20

责

221019

),

抗

-H

单克隆抗体

(

上

A

免疫球蛋白

B

抗体

(

DIA

液生物医药

G

G

有

(

限

抗

A

-

S

责

I

T

g

,

批

任

任

G

)

公

,

号

公司

,

批号

抗

46400

司

-C

,

3

批

d

号

]

0

检测试剂盒

),

抗

20

人

22

球

111

蛋

0

),

抗

-

检测试剂盒

(

上海血液生

20225001

)

(

,

上海血

白

[

抗

抗

-I

g

G

2

限责任公司

0215102

),

,

抗

物医药有限责任公司

,

批号

批号

C3d

检测试剂盒

(

上海血液生物医药有

红细胞试剂盒

(

上

2

海

02

血

25

液

20

生

1

)

物

,

人

医药

AB

有

O

血型反定型用

限责任公司

,

批

号

a

体检测试剂

M

2

e

0

d

23

G

5

m

31

b

3

H

)

(

/

,

人

B

低离子抗人球蛋白卡

i

血

o-

红

Ra

细

d

,

胞

批号

,

长

5

春

05

博

31

迅

.

-

微柱凝胶法

76

生

.1

物

0

技

),

术

不规则抗

(

Di-

有限

(

任公司

微柱凝

,

批

胶

号

法

2

)

S

0

e

2

r

2

a

1

s

2

c

0

a

8

n

)

D

,

i

红

ana

细

S

西班牙基立福公司

,

批号

3

胞

(

D

血

ia

型

g

n

抗

ost

体

ic

筛

G

选

rif

细

责

ols

胞

,

试剂盒

.A.

(

中国台湾

23007.01

);

核酸提取

1

S

7230

);

人类红细胞

RBCB

O

io

血型基因分型试剂盒

science

公司

,

批号

AB

P4

P

1

C

0

R

1-

-

t

20

S

2

P

法

00400

(

1

天

),

津

Me

秀

th

鹏

y

lE

生

d

g

物

e

T

技

M

B

术

isu

开

lfi

发

te

有

Co

限

nv

公

ers

司

ion

,

批

S

y

s

号

-

水

em

(

碧

(

Pr

云

om

天

e

g

E

TM

B

a

e

,

y

批号

otim

0

e

0

,

0

批

04

号

703

1

3

1

4

11

)

2

,

2

焦碳酸二乙酯处理

230306

),

TaKaRa

液

p

i

(

T

盒

(

T

a

A

a

q

B

k

I

ar

公司

a

H

,

S

批

(

,

批号

号

Ta

A

K

9

L

a

1

G

Ra

2

9

3

8

,

5

8

批号

4

A

89

)

)

,

AM

,

B

P

i

g

2

O

D

09

P

y

e

84

测

A

序

),

反

加样缓冲

应试剂

司

,

批号

7

测序胶

(

ABI

公

2

1

2

.

0

4

8

37

检测方法

8

)

22

。

11711

),

10×

电泳缓冲液

(

ABI

公司

,

批号

1.4.1

验

、

不规则抗体

A

血型血清学检测

检测

,

BO

血型正

/

反定

采集患者肘部静脉血进行

型鉴定

、

间接抗人球蛋白试

筛查采用微柱

分别与经盐水洗涤

3

D

次

AT

的

)

受

采

检

用

凝

者

试

胶

浓

管

卡

缩

法

法

红

;

和

将

试

细

抗

管法

;

直

接抗人球蛋白试验

(

胞

-A

等

、

量

抗

-

混

B

合进行吸收放散试验

。

所有试验操作均按照标准操

作规范

[

9-10

]

和试剂盒说明书进行

。

1.4.2 P

DN

0

C

0

R-SSP

检测

凝全血

4

μ

L

,

使用自

动

取患者乙二胺四乙酸外周抗

核酸提取仪提取基因组

。

A

按照人类红细胞

,

采用微量紫外分光光度计检测

DNA

浓度和纯

度

书进行

2.0%

的琼脂糖

PCR-SSP

法基

AB

因

O

血型基因分型试剂盒说明

分型

凝胶

,

将

5

μ

L

扩

PC

增

R

扩增试验

。

配制

件下电

PC

泳

R

产物进行电

泳检测

,

于

用凝胶成像系统成像

120V

恒定电压条

,

记录试验结果并根据试剂盒说

40min

后使

明书结果分型表判定基因型

。

1.4.3 ABO

基因启动子区甲基化检测

采用亚硫

酸氢盐测序法

(

C

C

p

on

G

岛甲基化

B

状

SP

态

)

。

检

根

测

据

标本

version

Met

A

h

B

l

O

基因启动子区

Ede

TM

Bisu

DNA

进行亚硫酸氢盐修饰

S

y

stem

试剂盒说明书

y

,

g

lfite

对患者基因组

,

使检测标本基因组

中未发生甲基化的胞嘧啶通过亚硫酸氢盐处理

D

后

N

转

A

化为尿嘧啶

,

甲基化的

数据库下载

C

p

G

胞嘧啶则不变

。

在

NCBI

p

resssoftwar

A

e

B

区富

v

O

基因序列

,

应用

1

含

.0

和

物

,

检测片段分别为

C

p

G

M

位

et

点

hP

的

rim

区

e

M

位点

,

分别编号为

1~1

175

3

、

,

1

扩

60

增

b

引

p

,

域

r

et

软

h

y

l

件

p

选

rim

取

erex-

基因启动子

,

并设计扩

A

增

B

引

O

物

共

由

包

生

含

工

13

生

个

物

C

工

p

程

G

G

(

上海

TTT

)

A

股份有限公司合成

GGTTGGAGTGT

,

上游引物序列

A

下游引

1

:

物

A

序

TG

列

T

1

T-

A

:

序列

CCA

游引

2

A

物

:

C

T

A

序

T

T

T

列

T

A

A

A

2

A

T

:

G

A

A

T

A

CC

A

A

T

G

T

A

T

CC

C

T

T

G

A

G

C

T

A

G

C

G

T

G

A

,

C

G

T

C

T

C

T

T

T

A

A

C

A

T

;

C

A

上

A

G

游引物

C

A

T

T

T

,

T

下

A

板

A

,

。

根据

以亚硫酸氢盐修饰后的患者基因组

DNA

为模

C

序列

。

(

后

5U

D

/

N

P

TaKaRaE

p

iTa

q

TM

HS

L

A

CR

反应体系为

)

模板

0.25

μ

2

L

μ

L

5

,

0

T

μ

A

L

K

,

A

包括亚硫酸氢盐修饰

说明书要求扩增目标

RAE

p

iTa

q

TM

(

H

2+

S

free

)

5

μ

μ

L

,

25mMM

,

1

g

0×E

Cl

2

t

5

p

μ

i

L

Ta

,

2

q

.

P

5

C

mM

RBu

d

f

N

fe

T

r

P

M

M

g

ix-

P

u

C

re

R

6

条件为

μ

L

,

上下游引物各

℃

,

30s

;

40

个

94

循

℃

环

,

1

;

7

m

2

in

℃

;

2

98

μ

L

终

℃

,

延

,

其余用无菌水补

伸

10s

;

57℃

足

;

终

,

30

止

s

在

;

72

。

4

℃

的条带进行切

。

将

PCR

产物进行

胶

,

使用

S

D

a

N

n

A

琼脂糖凝胶电泳后对目

10min

剂盒进行纯化回收

;

使用

H

Pre

p

柱式

T

D

M

NA

胶回收试

T

克隆

AC

;

lo

使用生工质粒提取试剂盒

nin

g

Kit

试剂盒对目的片段进行目的片段

ieffCloneZeroTOP

SK8191UNIQ-10

T

O-

柱

A

式质粒小量抽提试剂盒提取质粒

P

DNA

;

将质粒使用

否含有目的片

stⅠ

单酶切

,

琼脂糖凝胶电泳检查片段大小

,

确定是

段

,

鉴定阳性克隆子

;

将阳性克隆子送

生工生物工程

(

上海

)

股份有限公司进行序列分析

。

1.5

统计学处理

采用

Chromas

(

分析测序峰图

,

使用甲基化分析软件

Ve

软件

析目标序列

CG

位点甲基化情况

,

并

B

r

I

s

将

Q

ion

果以圆圈图输出

p

B

A

S

n

2

P

a

.

l

3

y

测

z

)

e

序

r

分

结

。

目标序列中有

计算

CG

岛甲基化位点数占总

13

个

C

p

G

岛位点

,

,

计算甲基化率

。

以

P

<0.05

C

为

G

岛位点的百

比

pp

分

差异有统计学

意义

。

2

结

2.1 A

果

BO

血型鉴定

O

型

,

反定型结果为

A

患者

型

,

正反定型结果不一致

ABO

血型正定型结果为

,

凝集

。

见表

4

时试管法可见

试验结果显示

,

A1c1

。

不规则抗体筛

℃

查

抗

-C3d

均为阴性

。

患者血浆与

集

。

见表

2DAT

结果显

3

种抗体筛查细胞均无凝

示

,

抗

。

吸收放散试验结果显示

-I

g

G+C3d

,

、

患者红细

抗

-I

g

G

、

胞表面存在

2.2 PCR-S

A

抗原

。

见表

SP

法检测

A

3

B

。

5

PC

、

7

R

、

-

1

S

0

S

孔为阴性

P

基因分型格局

。

对照人类红细胞

1

、

2

、

4

O

、

基因分型检测出患

6

、

8

、

9

A

、

者

1

B

1

孔为阳性

,

O

血型基因分

3

、

型试剂盒

(

天津秀鹏生物技术开发有限公司

)

结果分型

表判定患者基因型为

AO1

,

表型为

A

型

。

见图

1

。

,

检验医学与临床

2024

年

3

月第

21

卷第

5

期

LabMedClinMarch2024

,

Vol.21

,

No.5

表

1 ABO

血型鉴定正反定型结果

正定型反定型

抗

-H

4+

4+

4+

/

抗

-A1

/

0

0

0

Alc

0

0

0

Bc

S

·

697

·

方法

)

微柱凝胶法

(

Gel

)

试管法

(

RT-IS

抗

-A

0

0

0

0

抗

-B

0

0

0

0

抗

-AB

/

0

0

0

4+

2+

3+

1+

Oc

0

0

0

0

A2c

/

0

0

0

自身

c

0

0

0

0

)

试管法

(

4℃-IS

)

试管法

(

37℃-IS

2+

S

S

/

表示未检测

。

强度以

1~4

数值表示

;

表示凝集加强

;

注

:

0

表示阴性

;

1+~4+

表示阳性

,

抗筛试剂

红细胞

Ⅰ

Ⅱ

Ⅲ

抗筛试剂

红细胞

Ⅰ

Ⅱ

Ⅲ

Le

+

0

0

a

+

+

D

+

C

0

0

0

+

0

0

E

Rh-hr

表

2

不规则抗体筛查试验结果

e

C

W

+

+

0

c

+

+

P1

+

+

0

P

0

0

0

0

0

0

+

N

K

+

+

+

S

k

Kell

K

p

0

0

0

a

Js

a

nt

nt

nt

F

y

0

+

+

a

Duff

y

F

y

+

+

0

b

Jk

+

+

0

a

Kidd

Jk

0

+

+

b

Lewis

Le

0

+

+

b

0

+

+

M

MNS

+

0

+

0

+

+

+

+

0

s

Luth.

Lu

+

0

0

a

Colt.

Co

0

0

0

b

X

g

+

+

+

X

g

a

微柱凝胶法

0

0

0

注

:

0

表示阴性

;

+

表示阳性

。

表

3

受检者吸收放散试验结果

标本来源

患者

阴性对照

放散试验

A1c

0

Bc

0

0

Oc

0

0

患者标本

A2~4

。

甲基化状态分析结果显示

,

BO

基

因启动子区甲基化率为

6

高于随机选取的

5

例

6.7%

,

,

正常对照组标本平均甲基化率

(

差异有统计

<25%

)

)。

见图

5

。

学意义

(

P

<0.05

2+

注

:

0

表示阴性

;

+

表示阳性

。

2.3 ABO

基因启动子区甲基化检测

经

BSP

检测

待检测

ABO

基因启动子区部分序列的甲基化水平

,

标本

DNA

经亚硫酸氢盐试剂盒转化处理后甲基化的

胞嘧啶不发生改变

,

经

PCR

扩增和

TA

克隆测序检

测到该

C

而未甲基化修饰的胞嘧啶

G

位点仍为

CG

;

则转化为尿嘧啶

,

经

PCR

扩增和

TA

克隆测序检测

到该

CG

位点转化为

TG

。

检测标本的甲基化率指检

测区域中甲基化的

CG

数量与该区域

CG

总数量的

pp

比值

。

将

ABO

基因启动子富含

CG

岛区域检测片

p

段大小为

175

、

160bA

克隆测序

。

见图

p

序列进行

T

;

检测目的条带均同时检测内参质控带

,

内参为人类生长激素

2000b

p

片段大小从下至上依次为

1

注

:

00

、

250

、

500

、

750

、

1000b

p

和

。

基因的保守片段

,

大小约为

1000b

p

图

1 PCR-SSP

基因分型

箭头表示该

C

注

:

G

位点的

C

为甲基化的碱基

。

图

2 CG

岛甲基化

CG

位点

p

·

698

·

,

检验医学与临床

2024

年

3

月第

21

卷第

5

期

LabMedClinMarch2024

,

Vol.21

,

No.5

箭头表示

C

注

:

G

位点的

C

未被甲基化

,

CG

转化为

TG

。

图

3 CG

岛非甲基化

CG

位点

p

图中分别为患者标本和正常对

注

:

DZ1

、

DZ2

、

DZ3

、

DZ4

、

DZ5

为对照组标本

,

SC

为受检白血病患者标本

;

○

为非甲基化位点

,

●

为甲基化位点

;

照组标本

ABO

基因启动子

175b60b

p

和

1

p

区域甲基化状态分析情况

。

图

4

患者

ABO

基因启动子区甲基化状态

可快速

、

准确地鉴定疑难

A

并且进一步合理

BO

血型

,

解释疾病状态下抗原减弱的原因

,

为更加安全

、

合理

地解决临床疑难血型鉴定问题提供了新思路

。

验结果显示

,

正定型结果为

O

型

,

反定型结果为

A

型

,

正反定型结果不一致

。

排除微柱凝胶卡

、

反定型

试剂

、

离心设备运行及其他人为因素的干扰后采用试

与正常对照组比较

,

注

:

P

<0.001

。

a

本例患者使用微柱凝胶法进行

ABO

血型鉴定试

图

5

患者标本与正常对照组标本甲基化情况比较

管法分别于室温

、

4℃

和

37℃

条件下重复

ABO

正反

定型试验

,

结果显示

,

而

3

个温度下正定型均为

O

型

,

反定型在

4℃

时试管法可见

A

推测患者产生

1c

凝集

,

3

讨

论

白血病是一类造血干细胞异常的克隆性恶性疾

病

,

由于发生病变的白细胞失去分化成熟的能力

,

停

滞于其发育的不同阶段

,

进而引起患者骨髓和其他造

血组织中病变细胞大量增殖积聚并浸润其他器官和

组织

,

导致患者造血功能异常

,

出现病态造血而无法

产生足量的正常血细胞

,

临床表现为贫血

、

出血

、

感染

及各器官浸润症状

,

输血是白血病非常重要的辅助治

疗手段之一

[]

1-2

不规则抗

-A1

抗体

。

微柱凝胶法进行不规则抗体筛查

和试管法进行直接抗人球蛋白试验结果均为阴性

,

排

[

13

]

除是自身抗体造成的

ABO

正反定型不符

。

结合

患者处于白血病发作期

,

其

ABO

血型鉴定正反定型

不符可能是红细胞本身所致

,

经吸收放散试验后检出

患者红细胞表面存在弱

A

抗原

。

基于血液免疫学检

测试验

,

由白血病疾病状态下导致受试者

A

抗原减弱

。

在临床输血治疗过程中

ABO

血型

的正确鉴定尤为重要

。

人类

ABO

血型抗原由

ABO

与

ABO

亚型引起的红细胞抗原数量减少的试验检测

结果较为相似

,

难以鉴别

,

需进一步结合其他检测技

术加以鉴别

。

本研究使用分子生物学血型基因分型

本例患者

APCR-SSP

法进行检测

,

BO

基因分型结果

为

AO

表型为

A

型

,

即可排除

A

而

1

,

BO

亚型的可能

,

其正定型结果为弱

A

表型

,

有研究在髓系恶性肿

4

]

14-15

]

、、

瘤

[

骨髓增生异常综合征

[

急性髓系白血

]]

15-16

]

1718

、、

病

[

慢性粒细胞白血病

[

膀胱癌

[

和口腔

]

8

,

19

癌

[

等患者中均检测到

A

与

BO

抗原减弱的现象

,

本研究结果一致

。

基因编码

,

ABO

基因位于人类第

9

号染色体的长臂

,

属于常染色体显性遗传

,

一般情况下不会发生变

]

11

。

有研究表明

,

化

[

急性髓系白血病患者处于其病情

发作期可能出现红细胞血型抗原减弱

、

消失或变异

,

其原本的

A

导致

ABO

血型抗原无法正常检出

,

BO

正

/

反定型不一致

,

极易引起血型误判

,

影响输血安

]

12

。

近年来

,

全

[

分子生物学基因分型技术

、

血型基因

甲基化检测技术在

ABO

疑难血型鉴定中的广泛应

用

,

其将新技术与传统血型血清学鉴定技术相结合

,

目前

,

对于血型抗原减弱的确切原因尚未明确

,

且患者出现

A

在疾

BO

抗原减弱的现象不是持续的

,

,

检验医学与临床

2024

年

3

月第

21

卷第

5

期

LabMedClinMarch2024

,

Vol.21

,

No.5

·

699

·

病缓解后还有可能恢复血型抗原表达

[

20

]

体在白血病状态下的

,

而这种调控机制

A

目

BO

基因表达调控机制发生了

。

推测为机

改变前尚未明确

。

近年来

,

甲基

化已成为肿瘤研究的热点

,

甲基化是一种表观遗传修

饰方式

,

参与机体疾病状态下的基因表达调控

。

有研

究发现

,

白血病患者

致

患者

AB

A

O

基因沉默的关系更为密切

ABO

抗原减弱与

[

18

]

DNA

甲基化导

BO

基因启动子区

CG

岛甲基

。

化

基于此

状态的

,

推测

异常

可能与其

ABO

基因启动子区

A

抗原表达减弱有关

p

。

本研究对患者标本

175

、

160b

,

结果显示

,

检测区域患者标本

p

2

个区域甲基化状态

进行检测

动子区甲基化率为

正常对照组标本平均甲基化率

66.7%

,

明显高于随机选取的

ABO

基因启

5

例

学意义

(

P

<0.05

)。

有研究表

(

明

<2

,

5

A

%

BO

),

基

差异有统计

因启动子

C

程度越高

p

G

岛甲基化程度与

表达均减少

ABO

基因表达越不活跃

ABO

抗原表达呈负相关

,

甲基化

,

从而导致

[

5

,

8

,

18

]

,

与本研究结果一致

;

且白血病患者存在不同程度

A

、

。

提示患者白血病状态

A

B

、

抗原

原减弱

[

21

]

B

抗

下

原减弱之间存在较为密切的相关性

ABO

基因启动子区甲基化程度增高可能与

,

因机体抗原减弱的

ABO

抗

调控机制是多因素共同作用的结果

,

而

基化导致的基因表达下调仅可能只是

A

A

B

B

O

O

启动子甲

抗原减弱

的其中一个因素

,

其机制还需进一步探索

。

本研究结果提示

,

本例白血病患者在疾病发作

期

,

其

ABO

基因启动子区甲基化状态异常可作为导

致

反定型鉴定

ABO

抗原减弱的重要因素之一

,

从而干扰

。

在临床输血实践中开展血清学

A

疑

B

难

O

正

血

型鉴定的同时进行分子生物学基因分型和血型基因

甲基化检测可作为血清学方法的有效辅助手段

,

有效

缩短了输血相容性试验检测时间

,

保障临床用血安

全

、

合理

、

有效

,

为实现患者个体化血液管理

、

做到精

准输血提供了新思路

。

参考文献

[

1

]

IMAIY

,

MARUY

,

mechanisms

l

h

1

o

ist

5

g

i

o

ca

n

l

e

49.

m

de

a

a

li

c

g

e

n

t

a

y

l

n

a

c

s

i

e

es

in

[

J

hi

]

b

.

i

C

t

a

o

n

rs

ce

i

of

r

n

S

t

c

h

i

e

,

t

2

r

0

e

1

a

6

tm

,

1

e

0

n

7

t

(

o

1

f

1

h

)

e

:

m

15

at

4

o

3

-

-

[

2

]

B

o

OYIADZISM

,

r

g

in

g

roles

[

3

]

张勇

[

f

J

t

]

u

.L

m

,

e

o

刘剑荣

u

r

k

-d

e

e

m

r

i

i

a

ve

,

陈华良

,

2

d

0

e

1

x

7

o

,

s

3

o

,

1

m

等

(

6

es

.1

)

i

:

1

n

例

2

h

5

e

疑

9-

m

难

1

a

2

t

血

6

o

8

lo

型

.

g

icalmali

g

nancies

和疑难配血分析

[

4

]

B

[

J

I

]

A

.

实验与检验医学

,

NCOT

,

FARMER

20

B

15

J

,

,

3

S

3

A

(

G

3

E

):

3

R

89

E

-3

,

e

90.

cellA

,

B

,

andHanti

g

ensisfre

q

uentinm

y

t

e

a

l

l

oi

.

d

Lo

m

s

a

s

li

o

g

f

n

r

a

e

n

d

-

[

5

]

c

B

i

D

I

es

N

A

[

A

N

J

C

]

.

m

O

B

et

-

lo

h

M

o

y

I

d

la

O

,

2

ti

T

0

on

T

01

O

,

9

oft

T

7

h

,

(

1

e

HU

1

)

AB

S

:

3

O

S

6

E

33-3639

p

Y

rom

D

o

J

te

,

.

r

D

u

A

n

Y

der

T

lie

K

sl

,

o

et

ss

al

of

.

ABOallelicex

p

ressioninasi

g

nificant

p

ro

p

ortionofleu-

[

6

]

k

N

e

I

m

K

i

P

c

A

p

Y

atie

s

t

c

h

r

e

e

b

n

l

i

o

n

M

nt

o

g

d

i

p

d

r

e

,

s

o

n

R

[

t

t

e

i

A

J

f

V

]

o

ie

A

.P

m

s

T

LoS

I

e

D

[

J

N

S

]

A

,

One

,

2009

,

4

(

3

):

e4788.

-wide

e

.E

m

i

et

e

h

n

y

o

la

m

tion

,

sitesthatre

g

u

:

late

[

7

]

1

S

5

H

.

pg

ics2022

,

14

(

13

)

10-

AOM

,

LYUXP

,

TANGP

,

l

A

eu

B

k

O

em

an

ia

ti

[

g

J

e

]

n

.J

an

E

d

x

p

nor

H

m

e

a

m

l

at

A

o

B

l

,

O

20

a

1

n

7

ti

,

g

2

e

5

n

(

i

5

n

)

p

m

:

1

a

3

t

p

i

0

e

ar

7

n

i

-

t

s

1

s

on

31

w

ofweak

[

8

]

a

POKALAA

,

PARAMKUSAMG

,

TEJASWIM

3

it

L

.

hacute

A

,

et

ti

l

a

.

ll

H

y

is

m

to

a

-

l

b

i

g

lo

n

o

a

d

nt

g

d

r

i

o

s

u

o

p

rd

a

e

n

r

t

s

i

g

[

J

en

]

s

.A

in

sia

o

n

ral

Pa

c

c

an

J

ce

C

r

a

a

n

n

c

d

er

p

P

o

r

te

ev

n-

,

[

9

]

2

尚红

020

,():

北京

,

2

:

王毓三

141

人民卫生出版社

,

1

申子瑜

63-1166

.

全国临床检测操作规程

.

[

,

[

10

]

李勇

,

马学严

.

实用血

2

液

01

免

5

疫

:

11

学

8-

:

14

血

3

型

.

M

]

.4

版

.

理论和实验技术

[

11

]

[

刘墅竹

M

]

.

北京

:

科学出版社

,

,

姜琪

,

卢宝卫

.

急

20

性

06

白

:

5

血

88

病

-7

引

01

起

.

弱报告

[

[

12

]

霍姿含

,

J

孙

.

实用医技杂志

,

长杰

,

刘冰

.22

例

2006

,

1320

B

型血型抗原减

]():

3717.

学表现及原因分析

[

中国

A

实

BO

血型抗原减弱的血清

]

验诊断学

,

:

[

13

]

5

夏荣

10-51

J.2018

,

22

(

3

)

,

1

张琦

.

,

陈勤奋

.

自身免疫性溶血性贫血患者输血前

试验及临床输血专家共识

[

]

中国输

[

14

]

(

J.

血杂志

,

2017

,

30

朱剑荧

7

):

663

,

-6

胡

65

利

.

察

亚

[

,

兰炯

临

采

床

,

血

等

.

骨髓增生异常综合征

血型鉴定观

]

液学杂志

(

输血与检验

A

版

B

)

O

,

[

15

]

2

t

O

0

io

R

07

n

A

,

Z

2

of

I

0

(

A.

8

)

acu

H

:

1

J.

t

i

e

s

7

t

3

o

-1

dromes

,

andm

m

p

a

7

e

y

e

t

4

l

h

o

o

.

i

l

d

o

g

lodsl

l

y

a

e

s

u

in

ti

k

c

e

th

/

m

e

m

ia

d

e

,

ia

lo

m

g

nosisandclassifica-

r

y

o

e

l

l

i

o

f

d

er

y

a

s

t

p

i

l

v

a

e

stics

y

n-

[

16

]

S

[

J

HA

]

.P

O

ath

M

o

,

b

L

io

Y

lo

U

g

y

y

X

,

20

y

07

p

,

74

(

2

):

9

y

7-11

p

4.

diseases

meth

y

lationonAB

P

O

,

Y

g

e

A

n

N

e

G

ex

Q

p

re

K

ss

,

e

i

t

on

al

i

.

n

Ef

[

17

]

Z

S

honhuaXueY

,()

l

f

:

e

e

u

c

k

ts

em

o

i

f

a

D

[

J

N

]

A

.

wi

HA

g

th

F

c

I

hr

Q

on

M

ic

,

K

u

m

A

e

s

y

e

R

lo

I

X

i

M

ue

dl

F

Z

eu

.

a

k

R

e

e

Z

d

hi

mi

c

a

e

2

l

:

l

01

a

a

6

c

n

a

t

,

s

i

37

e

g

e

o

n

9

f

l

795-799.

A

os

B

s

O

in

[]

Aher

di

a

sc

p

r

a

e

ti

a

en

n

t

[

18

]

o

C

y

HIHARAY

,

SU

p

GAN

S

O

ci

K

,

20

,

K

15

O

,

B

52

A

(

Y

1

A

)

S

:

1

H

03

p

-

I

-1

A

0

,

4

et

.

c

f

au

b

s

l

e

o

d

od

b

y

g

r

a

o

l

u

ldormeth

y

lationoftheABOe

p

lic

A

lo

a

s

n

s

ti

g

a

e

n

n

/

ex

p

ressioninbladdercancer

[

19

]

g

M

en

f

g

ro

O

e

[

J

]

.LabInvest

,

2005

,

85

u

R

p

T

s

A

in

ZA

o

V

r

I

al

H

ca

,

n

H

ce

A

r

J

:

I

a

A

f

N

ir

S

st

,

(

F

7

c

A

)

as

D

:

8

e-

A

9

c

V

5-

o

I

90

nt

E

7

ro

,

l

e

.

t

s

a

t

l

u

.

d

A

y

B

i

O

n

b

a

lood

de-

[

20

]

P

in

侯瑞琴

re

e

v

d

,

2

g

r

0

o

,

1

u

杨洪

4

p

,

1

o

5

f

燕

(

3

Ir

,

)

a

苗

:

n

1

i

天

4

a

1

n

5

红

-

p

1

a

,

4

ti

等

1

e

8

n

.4

.

ts

[

J

]

.AsianPacJCancer

22

例

ABO

正反定型不符

的原因分析及处理对策

[

]

中国输血杂志

,

:

[

21

]

5

徐华

09-5

J.2016

,

29

(

5

)

,

1

鲍国强

1.

,

王宝燕

,

等

.ABO

基因启动子

CG

岛甲基

化与白血病的相关性

[

(

2

):

240-246.

J

]

.

中国实验血液学杂志

p

,

2008

,

16

(

收稿日期

:

2023-08-25

修回日期

:

2023-12-20

)